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RIPA Lysis Buffer(Medium)

RIPA裂解液(中)

¥128.00

CW2334S

100 mL

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RIPA裂解液是一种传统的组织以及细胞快速裂解液,主要用于从动物组织和哺乳动物细胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解贴壁细胞和悬浮细胞。按照其裂解液的强度可以分为强、中、弱三类,具体特点和差异请参考附表2,可根据实验需求选择相应产品。经RIPA裂解液(中)提取的蛋白可应用于蛋白定量、Western Blot、IP等检测分析。RIPA裂解液(中)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等。
保存条件 运输条件
2-8℃ 常温
Q1:该 RIPA 裂解液的适用范围是什么?
A1:

适用于提取动物组织或哺乳动物细胞的可溶性蛋白,可以提取细胞核、细胞膜和胞浆蛋白。

Q2:该裂解液主要用于哪些实验?
A2:

适用于蛋白质定量、Western BlotWB)、免疫沉淀(IP)等检测分析实验。

Q3:裂解产物中出现一小团透明胶状物,这是什么原因?如何去除?
A3:

该物质主要为基因组DNA-蛋白质复合物,属正常现象。若目标蛋白不与DNA紧密结合,离心后取上清即可;若需检测紧密结合的核蛋白,建议超声处理后离心取上清。

Q4:RIPA裂解液(强)和RIPA裂解液(中)如何选择?
A4:

根据目标蛋白的定位和性质选择。

RIPA裂解液(强):去垢剂强度高,能更彻底地裂解细胞核膜,提取核/膜蛋白等难溶性蛋白的效率更高,但可能破坏部分蛋白质间的相互作用。

RIPA裂解液(中):去垢剂强度温和,能有效裂解细胞膜和胞浆,同时对细胞核膜的作用较温和,有助于保持蛋白质的天然活性和相互作用,适用于常规蛋白提取及免疫沉淀实验。

Q5:使用RIPA裂解液时发生蛋白降解,应如何解决?
A5:

蛋白降解通常因未抑制蛋白酶活性所致。建议在使用前于裂解液中添加蛋白酶抑制剂混合物(CW2200S),并在冰上操作以维持低温环境。

Q6:使用RIPA裂解液检测时磷酸化信号弱,可能是什么原因?
A6:

磷酸化水平低通常源于样本中磷酸酶的降解作用。建议在裂解前添加专用的磷酸酶抑制剂混合物(CW2383S),并确保操作全程低温,以有效保护磷酸化修饰。

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