您当前的位置:首页 >产品中心

核酸提取或纯化试剂

¥558.00

CWY017S

型号一,50次/盒

- + [ 现货 ]

加入购物车

  • 产品介绍
  • 产品参数
  • 产品说明书
  • FAQs
本试剂盒适用于福尔马林固定或组织切片样本中的基因组DNA提取。试剂盒内含经优化过的脱蜡剂、裂解液和蛋白酶K,可有效释放样本中的DNA;消化后的样本经高温孵育,进一步解除福尔马林交联,有效提升DNA的产量与纯度。在优化的缓冲体系作用下,DNA可特异性结合至吸附膜,两步洗涤有效去除抑制剂等杂质,最后经低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度基因组DNA。纯化所得DNA可直接用于PCR、Real-time PCR、SNP/STR基因分型、二代测序及药物基因组学分析等下游应用。
保存条件 运输条件
吸附柱2-8℃,其余组分0-35℃ 常温
Q1:CWY017S的适用于哪些类型样本?
A1:

CWY017S适用于从福尔马林固定或石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取高质量基因组DNA。

Q2:蛋白酶K如何配制?
A2:

向每支25 mg蛋白酶K粉末中加入1.25 mL蛋白酶K保存液,轻柔混匀溶解,终浓度为20 mg/mL。分装后于-20℃保存,避免反复冻融。

Q3:裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂出现沉淀怎么办?
A3:

若裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。

Q4:脱蜡剂凝固了怎么办?
A4:

脱蜡剂在低于18℃时会凝固,属正常现象。使用前可在56℃水浴中加热融化,不影响使用效果。

Q5:使用CWY017S提取的DNA出现RNA污染该如何解决?
A5:

如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在样品90℃孵育降至室温后向样品中加入2 μL RNase A100 mg/mL),震荡混匀,室温放置2分钟。

Q6:如何防止FFPE样本中常见的C>T/G>A假突变?
A6:

可在90℃孵育后、RNA酶处理前,加入7 μL UNG(需另购,货号CW0951S),50℃孵育5分钟。

Q7:加入裂解缓冲液2和无水乙醇后出现白色沉淀是否正常?
A7:

加入裂解缓冲液2 和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。

Q8:能否用水洗脱DNA?
A8:

若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液洗脱,并于-20℃保存。

Q9:DNA产量低可能是什么原因?
A9:

1) 脱蜡不彻底:确保按说明书步骤操作,充分涡旋和离心。

2) 交联未充分逆转:确保90℃孵育1小时。

3) 乙醇未添加:确认已按试剂瓶标签说明向漂洗缓冲液1和2中加入相应体积的无水乙醇。

4) 洗脱问题:尝试用预热的洗脱缓冲液,并室温静置5分钟再离心。或进行二次洗脱。

Q10:使用CWY017S提取的DNA纯度低该如何解决?
A10:

1) 确保充分脱蜡与裂解:脱蜡后务必充分涡旋震荡并离心,使蜡层与水相清晰分离。后续的56℃和90℃孵育步骤必须时间充足,以确保组织样本完全溶解。

2) 保证蛋白酶K活性:使用前务必按说明书要求加入指定体积的蛋白酶K保存液使其完全溶解,-20℃保存,避免反复冻融。

3) 彻底去除乙醇残留:漂洗步骤后,应在洗脱前将吸附柱开盖置于室温数分钟,以确保残余乙醇完全挥发。同时,请确认漂洗缓冲液已按试剂瓶标签说明加入了相应体积的无水乙醇。

4) 消除RNA污染:若下游应用对DNA纯度要求极高,可在样品90℃孵育降至室温后加入2 μL RNase A100 mg/mL),震荡混匀后室温放置2分钟。

微信小程序

 客  服
 咨  询

公众号二维码