
核酸提取或纯化试剂
¥558.00
CWY017S
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保存条件 | 运输条件 |
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吸附柱2-8℃,其余组分0-35℃ | 常温 |

CWY017S适用于从福尔马林固定或石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取高质量基因组DNA。
向每支25 mg蛋白酶K粉末中加入1.25 mL蛋白酶K保存液,轻柔混匀溶解,终浓度为20 mg/mL。分装后于-20℃保存,避免反复冻融。
若裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。
脱蜡剂在低于18℃时会凝固,属正常现象。使用前可在56℃水浴中加热融化,不影响使用效果。
如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在样品90℃孵育降至室温后向样品中加入2 μL 的RNase A(100 mg/mL),震荡混匀,室温放置2分钟。
可在90℃孵育后、RNA酶处理前,加入7 μL UNG(需另购,货号CW0951S),50℃孵育5分钟。
加入裂解缓冲液2 和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液洗脱,并于-20℃保存。
1) 脱蜡不彻底:确保按说明书步骤操作,充分涡旋和离心。
2) 交联未充分逆转:确保90℃孵育1小时。
3) 乙醇未添加:确认已按试剂瓶标签说明向漂洗缓冲液1和2中加入相应体积的无水乙醇。
4) 洗脱问题:尝试用预热的洗脱缓冲液,并室温静置5分钟再离心。或进行二次洗脱。
1) 确保充分脱蜡与裂解:脱蜡后务必充分涡旋震荡并离心,使蜡层与水相清晰分离。后续的56℃和90℃孵育步骤必须时间充足,以确保组织样本完全溶解。
2) 保证蛋白酶K活性:使用前务必按说明书要求加入指定体积的蛋白酶K保存液使其完全溶解,-20℃保存,避免反复冻融。
3) 彻底去除乙醇残留:漂洗步骤后,应在洗脱前将吸附柱开盖置于室温数分钟,以确保残余乙醇完全挥发。同时,请确认漂洗缓冲液已按试剂瓶标签说明加入了相应体积的无水乙醇。
4) 消除RNA污染:若下游应用对DNA纯度要求极高,可在样品90℃孵育降至室温后加入2 μL RNase A(100 mg/mL),震荡混匀后室温放置2分钟。