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核酸提取试剂

¥498.00

CWY032S

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本试剂盒使用专门优化的裂解液和蛋白酶K,释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除由福尔马林交联造成的抑制作用,有效释放组织切片中的RNA,而避免危害RNA的完整性;优化的缓冲系统使裂解液中的RNA可特异结合到硅胶吸附膜上,而其他污染物可流过膜;可通过漂洗步骤有效去除,经过洗脱的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time PCR和印迹分析等实验。

保存条件 运输条件
DNA酶及10×DNA酶反应液 -20℃保存,其它组分15-30℃保存 常温
Q1:CWY032S适用于哪些类型样本?
A1:

CWY032S适用于从福尔马林固定或石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取RNA

Q2:蛋白酶K如何配制和保存?
A2:

12.5 mg蛋白酶K粉末中加入0.625 mL蛋白酶K保存液溶解,配制后应于-20℃保存,避免反复冻融。

Q3:裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂出现沉淀怎么办?
A3:

若裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。

Q4:使用CWY032S提取的RNA出现基因组DNA污染该如何解决?
A4:

说明书提供了可选步骤,使用DNA酶混合液处理吸附柱以去除基因组DNA

Q5:方案A和方案B(脱蜡方法)有什么区别?
A5:

方案使用试剂盒自带的 脱蜡剂,在56℃孵育;方案使用自备的二甲苯和无水乙醇进行脱蜡。

Q6:加入无水乙醇后出现沉淀正常吗?
A6:

正常。加入无水乙醇后,可能有少量沉淀物析出,不影响后续实验。

Q7:如何预防RNase污染?
A7:

1) 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。

2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。

3) 配制溶液应使用无RNase的水。

4) 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

Q8:RNA产量低的原因及解决办法?
A8:

1) 组织在福尔马林中固定时间过长。解决办法:确保组织固定时间在14-24小时以内。

2) 脱蜡不彻底。解决办法:确保按说明书步骤操作,充分涡旋和离心。

3) 蛋白酶K保存不当导致活性降低。解决办法: 确保蛋白酶K粉末在用保存液溶解后,于-20℃保存,避免反复冻融。

4) 洗脱操作不当。解决办法: 使用≥20 μL洗脱缓冲液,滴于膜中央并室温静置5分钟后再离心。

5) 乙醇残留抑制洗脱。解决办法: 洗脱前将吸附柱置于室温放置数分钟,确保乙醇完全挥发。

6) 乙醇未添加:确认已按试剂瓶标签说明向漂洗缓冲液2中加入相应体积的无水乙醇。

 

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