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核酸提取或纯化试剂

¥1098.00

CWY039S-32

型号二,96次/盒
型号一,96次/盒

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本试剂盒适用于福尔马林固定或组织切片样本的DNA提取,采用无毒的脱蜡剂去除石蜡,降低实验过程中对实验者的危害。组织裂解后,DNA结合于硅基包被磁珠表面。漂洗后,高纯度的DNA洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。 经过纯化的DNA可以直接用于PCR、荧光定量PCR、SNP基因分型、STR基因分型、二代测序和药物基因组学研究等。DNA的得率、片段大小与样品类型、储存条件及储存时间有很大关系
保存条件 运输条件
4-30℃ 常温
Q1:CWY039S适用于哪些类型样本?
A1:

CWY039S适用于从福尔马林固定或石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取高质量基因组DNA

Q2:蛋白酶K如何配制?
A2:

向每支25 mg蛋白酶K粉末中加入1.25 mL蛋白酶K保存液,轻柔混匀溶解,终浓度为20 mg/mL。分装后于-20℃保存,避免反复冻融。

Q3:裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂出现沉淀怎么办?
A3:

若裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。

Q4:脱蜡剂凝固了怎么办?
A4:

脱蜡剂在低于18℃时会凝固,属正常现象。使用前可在56℃水浴中加热融化,不影响使用效果。

Q5:使用CWY039S提取的DNA出现RNA污染该如何解决?
A5:

如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在样品90℃孵育降至室温后向样品中加入2 μL RNase A100 mg/mL),震荡混匀,室温放置2分钟。

Q6:如何防止FFPE样本中常见的C>T/G>A假突变?
A6:

可在90℃孵育后、RNA酶处理前,加入7 μL UNG(需另购,货号CW0951S),50℃孵育5分钟。

Q7:磁珠悬浮液使用时应注意什么?
A7:

磁珠悬浮液严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需涡旋振荡20秒以确保均匀性。

Q8:是否支持自动化提取?
A8:

支持,该试剂盒可与CWE2100 32通道核酸提取仪和CWE9600 96通道核酸提取仪进行匹配使用。

Q9:DNA提取得率低可能是什么原因?
A9:

可能原因包括:

1) 脱蜡不彻底。解决办法:确保按说明书步骤操作,充分涡旋和离心。

2) 交联未充分逆转。解决办法:确保90℃孵育1小时。

3) 磁珠悬浮液未充分混匀。解决办法:磁珠悬浮液使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。处理多个样本时,应每隔几个样本重新混匀一次,防止磁珠沉降。

4) 洗脱效率不足。解决办法:适当增加洗脱体积或延长洗脱时间,并确保在56℃条件下进行振荡洗脱。

5) 磁珠在晾干过程中过度干燥。解决办法:乙醇挥发(晾干)时间不宜过长。待管壁液体挥发后,观察到磁珠表面由湿润反光变为哑光、且无干裂状时即可。

6) 漂洗液配制错误。解决办法:漂洗缓冲液12第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明加入相应体积的无水乙醇并做好标记。

Q10:提取的DNA纯度低该如何解决?
A10:

1) 确保充分脱蜡与裂解:脱蜡后务必充分涡旋震荡并离心,使蜡层与水相清晰分离。后续的56℃和90℃孵育步骤必须时间充足,以确保组织样本完全溶解。

2) 保证蛋白酶K活性:使用前务必按说明书要求加入指定体积的蛋白酶K保存液使其完全溶解,-20℃保存,避免反复冻融。

3) 彻底去除乙醇残留:漂洗步骤完成后应开盖室温放置数分钟,确保乙醇完全挥发。同时,请确认漂洗缓冲液已按试剂瓶标签说明加入了相应体积的无水乙醇。4) 消除RNA污染:若下游应用对DNA纯度要求极高,可在样品90℃孵育降至室温后加入2 μL RNase A100 mg/mL),震荡混匀后室温放置2分钟。

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