您当前的位置:首页 >产品中心

核酸提取或纯化试剂

¥1098.00

CWY118S

型号二,50次/盒

- + [ 现货 ]

加入购物车

  • 产品介绍
  • 产品参数
  • 产品说明书
  • FAQs
本试剂盒适用于福尔马林固定或组织切片样本中的基因组DNA和总RNA提取。试剂盒内含经优化过的脱蜡剂、裂解液和蛋白酶K,可有效释放样本中的核酸;消化后的样本经高温孵育,进一步解除福尔马林交联,有效提升核酸的产量与纯度。在优化的缓冲体系作用下,核酸可特异性结合至吸附膜,两步洗涤有效去除抑制剂等杂质,最后经低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度核酸。经纯化所得的核酸可直接用于PCR、Real-time PCR、SNP/STR基因分型、二代测序及药物基因组学分析等下游应用。
保存条件 运输条件
DNA酶和10×DNA酶反应液-20℃,吸附柱2-8℃,其余组分0-35℃ 吸附柱、DNA酶和10×DNA酶反应液冰袋运输,其余组分常温
Q1:CWY118S适用于哪些类型样本?
A1:

CWY118S适用于从福尔马林固定或石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取核酸。

Q2:蛋白酶K如何配制?
A2:

向每支25 mg蛋白酶K粉末中加入1.25 mL蛋白酶K保存液,轻柔混匀溶解,终浓度为20 mg/mL。分装后于-20℃保存,避免反复冻融。

Q3:脱蜡剂凝固了怎么办?
A3:

脱蜡剂在低于18℃时会凝固,属正常现象。使用前可在56℃水浴中加热融化,不影响使用效果。

Q4:裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂出现沉淀怎么办?
A4:

若裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。

Q5:吸附柱堵塞如何处理?
A5:

吸附柱堵塞通常因样本量过多导致。建议减少起始组织切片数量至1-2片,并确保裂解充分。

Q6: RNA和DNA提取的起始材料如何区分?
A6:

裂解离心后,上清液用于RNA提取,沉淀用于DNA提取。转移上清时切勿吸到沉淀。

Q7:如何预防RNase污染?
A7:

1. 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。

2. 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。

3. 配制溶液应使用无RNase的水。

4. 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

Q8:提取核酸产量低的原因及解决办法?
A8:

1) 样本量过多或过少:切片数量或组织量超出推荐范围(建议1–5片,约1×1 cm²)可能导致裂解不彻底或吸附柱堵塞。建议减少起始样本量至1–2片,确保充分裂解和顺利过柱。

2) 脱蜡不彻底:脱蜡步骤若未彻底去除石蜡,会影响后续裂解和核酸释放。需确保脱蜡后彻底吸弃上清,避免残留脱蜡液。可用小体积枪头小心吸除残留液体。

3) 蛋白酶K活性不足:蛋白酶K若反复冻融或保存不当,活性下降会影响裂解效率。应置于-20℃保存,避免多次冻融。

4) 乙醇残留:漂洗后若乙醇未彻底挥发,会抑制后续酶反应并影响洗脱效率。建议延长离心晾干时间(室温5分钟),确保吸附柱完全干燥。

5) 洗脱条件不当:洗脱液pH值或体积不合适会影响回收率。若用水洗脱,需确保pH在7.0–8.5之间;建议使用洗脱缓冲液,适当延长室温静置时间(5分钟),或进行二次洗脱以提高产量。

6) 样本保存或处理问题:若样本长期暴露于空气中或固定不当,可能导致核酸降解。建议使用新鲜样本,避免表面氧化层,弃用接触空气的2–3片切片。

Q9:RNA产物中有DNA污染该如何解决?
A9:

若RNA产物中存在DNA污染,可使用试剂盒内附的DNA酶进行处理。在RNA提取过程中,当样本裂解液结合至吸附柱RS并初步离心后,请按以下步骤操作:

1) 向吸附柱中加入350 μL漂洗缓冲液3,12,000 rpm离心1分钟,弃废液;

2) 配制DNase I混合液:52 μL灭菌水加入8 μL 10×DNA酶反应液和20 μL DNA酶(1 U/μL),混匀后全部加入吸附柱中;

3) 20–30℃孵育15分钟;

4) 再加入350 μL漂洗缓冲液312,000 rpm离心1分钟,弃废液,后续按说明书继续操作即可。

Q10:DNA产物中有RNA污染该如何解决?
A10:

若DNA提取产物中存在RNA污染,可通过以下步骤处理:

DNA提取过程中加入RNAA消化步骤。具体而言,在样本裂解后、加入裂解缓冲液2前,将样品温度降至室温,加入2μL浓度为100mg/mLRNAA溶液,震荡混匀后室温放置2分钟,即可有效去除RNA污染。

微信小程序

 客  服
 咨  询

公众号二维码