RNApure Fast Tissue&Cell Kit
组织&细胞RNA快速提取试剂盒
¥598.00
CW0599S
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- FAQs
本产品采用硅胶柱纯化技术，可从动物组织、细胞中快速提取总RNA。提取过程中无需使用β-巯基乙醇和酚/氯仿等有毒有害试剂，最快7 min即可提取得到高质量的RNA。本试剂盒可同时处理大量不同样本，且含有2种提取方案，满足不同需求。提取的总RNA得率高、纯度好、无蛋白质和其他杂质污染，可用于RT-PCR、RT qPCR、芯片分析、体外翻译等多种下游实验。
▪ 适用范围广：独特的裂解液配方充分裂解细胞或组织并释放核酸，适用于多种动物组织和细胞样本的RNA提取。
▪ 安全无毒：无需使用酚氯仿、β-巯基乙醇等有毒有害试剂。
▪ 操作简便：最快7min即可完成。
▪ 通用性强：两种操作方案，分别满足快速和高得率的不同需求。
1. 适用范围广
【实验一】使用康为世纪CW0599S提取不同细胞和组织样本，进行琼脂糖凝胶电泳分析，结果如下：
图1：不同样本类型提取结果
实验结果表明：康为世纪组织&细胞提取试剂盒可兼容提取各种动物组织&细胞样本，获得的RNA产量高，完整性好，无其他杂质污染。
2.得率高，完整性好
【实验二】使用康为世纪CW0599S与品牌A公司和B公司同类产品同时提取CHO细胞样本的总RNA，进行浓度测定和琼脂糖凝胶电泳分析，结果如下：
图2：CW0598S与A、B公司同类产品对比结果
实验结果表明：康为世纪CW0599S常规方案和快速方案提取的RNA产量高，完整性好。
| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| RT（15-30℃） | 室温 |
适用于从动物细胞及组织中高效提取总RNA。
1) 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3) 配制溶液应使用无RNase的水。
4) 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
正常。加入无水乙醇后，可能有少量沉淀物析出，不影响后续实验。
1) 样本投入量过多。解决办法：减少样本投入量，DNA/RNA含量丰富的特殊样本（肝、脾及肾脏等），请勿超过10 mg，过量的样本投入量反而会降低得率和纯度。
2) 样本研磨或匀浆不充分。解决办法：增加样本研磨或匀浆时间；将裂解样本先12,000 rpm离心5 min，部分样本离心后表面可能有脂质层，转移上清液时请注意。
3) 样本富含肌纤维。解决办法：肌肉、心脏、皮肤和一些低等生物等富含肌纤维的样本，应采用液氮研磨方式，加大研磨程度。
4) 裂解液粘稠。解决办法：增大裂解液体积。
5) 样本复杂。解决办法：高脂肪、高纤维、高蛋白、多糖类、多杂质等复杂样本使用操作步骤（常规），并减少投入量。
1) 投入量过多或过少。解决办法：增加投入量，组织请勿超过20 mg，细胞请勿超过5× 106个，过量的样本投入量反而会降低得率和纯度。
2) 样本保存不当。解决办法：内源性RNase、反复冻融或保存温度不合适，导致RNA降解，应采用新鲜或-80℃未冻融的样本。
3) 样本处理不当，组织研磨或匀浆不充分。解决办法：增加样本研磨或匀浆时间；加大裂解液体积和裂解时间。
4) 结合环境不够。解决办法：增加结合时乙醇用量，快速法可从0.5倍无水乙醇最高增加到1倍无水乙醇，常规法1倍70%乙醇最高增加到2倍70%乙醇。
5) 乙醇残留。解决办法：进行空离2 min，将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干，小心从收集管上取下吸附柱，避免接触乙醇。
6) 洗脱不充分。解决办法：可将洗脱液在65℃提前预热，滴加至吸附膜中间部位后，室温静置2 - 5 min；或者离心后进行二次洗脱。
1) 投入量过多或过少。解决办法：RNA浓度低会造成测量的纯度低，可以增加投入量，组织请勿超过20 mg，细胞请勿超过5 × 106个，过量的样本投入量反而会降低得率和纯度。
2) 盐离子残留。解决办法：进行Buffer RW2漂洗两次；加入Buffer RW2时可沿吸附柱管壁四周加入；加入Buffer RW2后，颠倒混匀2 - 3次；加入Buffer RW2后，静置5 min，然后离心。
3) 乙醇残留。解决办法：进行空离2 min，将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干，小心从收集管上取下吸附柱，避免接触乙醇。
不同样本DNA/RNA含量相差大，投入量请勿超过20 mg组织和5 × 106细胞；肝、脾和肾DNA含量丰富，请勿超过10 mg。若需进一步去除gDNA残留，可使用DNase I进行消化。
