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核酸提取或纯化试剂

¥1098.00

CWY133S

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本试剂盒使用专门优化的裂解液和蛋白酶K,释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除由福尔马林交联造成的抑制作用,有效释放组织切片中的RNA,而避免危害RNA的完整性;组织裂解后,RNA结合于硅基包被磁珠表面。漂洗后,高纯度的RNA洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中,经过纯化的RNA可直接用于RT-PCR、ReaL-Time PCR和印迹分析等实验。

保存条件 运输条件
DNA酶和10×DNA酶反应液-20℃,其余组分0-35℃ DNA酶和10×DNA酶反应液冰袋运输,其余组分常温运输
Q1:CWY133S适用于哪些类型样本?
A1:

CWY133S适用于从福尔马林固定或石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取RNA

Q2:裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂出现沉淀怎么办?
A2:

若裂解缓冲液1、裂解缓冲液2和脱蜡剂有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。

Q3:DNase I 工作液如何配制
A3:

52 μL灭菌水,向其中加入8 μL 10×DNA酶反应液和20 μL DNA酶(1 U/μL),混匀, 配制成终体积为80 μL的工作液。

Q4:脱蜡剂凝固了怎么办?
A4:

脱蜡剂在低于18℃时会凝固,属正常现象。使用前可在56℃水浴中加热融化,不影响使用效果。

Q5:磁珠悬浮液使用时应注意什么?
A5:

磁珠悬浮液严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需涡旋振荡20秒以确保均匀性。

Q6:是否支持自动化提取?
A6:

支持,该试剂盒可与CWE2100 32通道核酸提取仪进行匹配使用。

Q7:如何预防RNase污染?
A7:

1) 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。

2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。

3) 配制溶液应使用无RNase的水。

4) 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

Q8:手动提取RNA产量低的原因及解决办法?
A8:

1) 组织在福尔马林中固定时间过长。解决办法:确保组织固定时间在14-24小时以内。

2) 脱蜡不彻底。解决办法:确保按说明书步骤操作,充分涡旋和离心。

3) 磁珠悬浮液未充分混匀。解决办法:磁珠悬浮液使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。处理多个样本时,应每隔几个样本重新混匀一次,防止磁珠沉降。

4) 磁珠在晾干过程中过度干燥。解决办法:乙醇挥发(晾干)时间不宜过长。待管壁液体挥发后,观察到磁珠表面由湿润反光变为哑光、且无干裂状时即可。

5) 洗脱效率不足。解决办法:适当增加洗脱体积或延长洗脱时间,并确保在56℃条件下进行振荡洗脱。

6) 乙醇未添加:确认已按试剂瓶标签说明向漂洗缓冲液2中加入相应体积的无水乙醇。

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