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Magbead HMW DNA Kit

磁珠法高分子量DNA提取试剂盒

¥398.00

CW3701S

10 preps
50 preps

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该试剂盒创新性的采用了超顺磁性的微米级磁珠纯化技术,应用于广泛样本的高分子量 DNA(50-200kb)的提取,包括动物组织、血液、细菌和细胞等。高性能的磁珠能够使整个提取时间短至一小时之内,同时确保分离的DNA具有较高的得率和纯度。高度选择性的微米级磁珠结合技术,能够很大程度上减少提取过程中的剪切力,从而得到高纯度的高分子量DNA。纯化的DNA完整度高,长度长,适合运用于NGS、三代测序高质量DNA文库构建等下游分子生物学实验。

保存条件 运输条件
2-30℃ 室温
Q1:该试剂盒适用于哪些样本类型?
A1:

适用于动物组织(如脾脏、肌肉等)、全血、细菌(革兰氏阳性/阴性菌)和培养细胞等样本的高分子量DNA50~200 kb)提取。

Q2:DNA提取产量低的原因及解决办法?
A2:DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作: 1. 缓冲液储存温度低(<15℃),可能会导致形成沉淀。解决办法:用前请先检查Buffer ATL、Buffer AL是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀,可在37℃水浴几分钟,溶液恢复澄清。 2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。 3. 磁珠未充分混匀。解决办法:使用磁珠时,需充分涡旋混匀至少30秒以混匀磁珠,每加6-10个样本再次涡旋10秒。 4. 样本裂解不完全。解决办法:适当延长Proteinase K的孵育时间。 5. 冻存血液样本解冻后混合不当。解决办法:在37℃水浴中快速解冻冷冻血液样本,并轻微搅拌,以确保充分混合 6. 由于不溶物堵塞枪头。解决办法:为了去除不溶性物质,将样品在20,000×g下离心3分钟,并将上清转移到新的样品管中。 7. 起始物料的储存不当。解决办法:使用新鲜或妥善保存的样本(避免反复冻融)。 8. 样本投入量太多。解决办法:减少样本的投入量。 9. Buffer EB冲洗期间DNA丢失。解决办法:当磁珠被磁铁分离吸弃溶液时,避免接触到磁珠。
Q3:DNA在下游应用中表现不佳该如何解决?
A3:

DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:

1. 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A2部分的解决方案。

2. 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管试管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。

3. 存在盐离子残留。解决办法:严格按顺序添加Buffer EB和Buffer TB,并确保洗涤步骤中彻底去除Buffer DW。必要时可用细尖移液枪头吸尽残留液体 。

4. DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260nm处测定DNA浓度,精确控制使用量。

5. 组织来源DNA发生降解。解决办法:样本量过大可能导致裂解不充分,使内源DNA酶未被完全灭活,建议减少起始样本量。

Q4:纯化DNA的A260/A280比值较低该如何解决?
A4:

DNA纯度偏低(A260/A280比值较低)的常见原因及解决方案:

1. 乙醇残留导致比值偏低。解决办法:最后洗涤步骤需彻底去除乙醇,严格按说明书用Buffer EB冲洗磁珠。

2. 盐离子残留影响测量。解决办法:确保结合和Buffer DW洗涤后完全清除上清,必要时用细枪头吸尽残留液体。

3. 未校正背景值造成偏差。解决办法:必须测定320 nm吸光度,并从260 nm和280 nm读数中扣除该背景值。

4. 水洗脱导致pH不稳定。解决办法:避免使用纯水洗脱,建议采用Buffer EB等缓冲液维持稳定pH值。

Q5:Magbeads G使用时应注意什么?
A5:

Magbeads G严禁冰冻和离心,使用前需涡旋振荡30秒混匀。 

Q6:如何避免DNA断裂?
A6:

操作过程中需轻柔混匀(避免剧烈震荡或涡旋),减少剪切力。

Q7:提取gDNA的同时可以提取到cfDNA吗?
A7:

可以提,但由于cfDNA本身含量较少,且红细胞裂解后释放的核酸酶会降解cfDNA。建议使用专门的试剂盒进行提取。

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