
核酸提取或纯化试剂
¥1198.00
CWY136S
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该试剂盒提供了一种从微量样本中提取DNA的方法,适用于微量血液、唾液、尿液、血片、血斑、拭子、组织、毛发、指甲、烟头、骨骼、牙齿样本。
DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:
1. 裂解缓冲液出现沉淀。解决办法:用前请先检查裂解缓冲液是否出现沉淀,如有沉淀,可在56℃水浴几分钟重新溶解。
2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。
3. 漂洗过程中出现DNA损失。解决办法:漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2使用前应按试剂瓶标签加入无水乙醇。
4. 磁珠悬浮液及异丙醇-磁珠混合物混匀不充分。解决办法:
(1) 磁珠悬浮液使用前需充分涡旋混匀至少20秒;
(2)异丙醇-磁珠混合液配制后必须再次涡旋振荡20秒以确保溶液均一;
(3)每处理6-10个样本后需补充涡旋10秒以维持溶液稳定性。
5. 样本裂解不完全。解决办法:加入裂解缓冲液后涡旋10秒使其充分混匀。
DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:
1. 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A2部分的解决方案。
2. 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。
3. 存在盐离子残留。解决办法:严格按操作顺序使用漂洗缓冲液,特别注意确保漂洗缓冲液2完全去除。
4. DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260 nm处测定DNA浓度,精确控制使用量
DNA纯度偏低(A260/A280比值较低)的常见原因及解决方案:
1. 乙醇残留导致比值偏低。解决办法:洗脱前确保乙醇完全挥发。
2. 蛋白质残留。解决办法:可重复漂洗缓冲液1的漂洗步骤。
3. 未校正背景值造成偏差。解决办法:必须测定320 nm吸光度,并从260 nm和280 nm读数中扣除该背景值。
4. 水洗脱导致pH不稳定。解决办法:避免使用纯水洗脱,建议采用洗脱缓冲液维持稳定pH值。
磁珠悬浮液严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。
若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液洗脱,并于-20℃保存。
该试剂盒提供了一种从微量样本中提取DNA的方法,适用于微量血液、唾液、尿液、血片、血斑、拭子、组织、毛发、指甲、烟头、骨骼、牙齿样本。
DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:
1. 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A2部分的解决方案。
2. 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。
3. 存在盐离子残留。解决办法:严格按操作顺序使用漂洗缓冲液,特别注意确保漂洗缓冲液2完全去除。
4. DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260 nm处测定DNA浓度,精确控制使用量
DNA纯度偏低(A260/A280比值较低)的常见原因及解决方案:
1. 乙醇残留导致比值偏低。解决办法:洗脱前确保乙醇完全挥发。
2. 蛋白质残留。解决办法:可重复漂洗缓冲液1的漂洗步骤。
3. 未校正背景值造成偏差。解决办法:必须测定320 nm吸光度,并从260 nm和280 nm读数中扣除该背景值。
4. 水洗脱导致pH不稳定。解决办法:避免使用纯水洗脱,建议采用洗脱缓冲液维持稳定pH值。
磁珠悬浮液严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。
若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液洗脱,并于-20℃保存。
DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:
1. 裂解缓冲液出现沉淀。解决办法:用前请先检查裂解缓冲液是否出现沉淀,如有沉淀,可在56℃水浴几分钟重新溶解。
2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。
3. 漂洗过程中出现DNA损失。解决办法:漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2使用前应按试剂瓶标签加入无水乙醇。
4. 磁珠悬浮液及异丙醇-磁珠混合物混匀不充分。解决办法:(1) 磁珠悬浮液使用前需充分涡旋混匀至少20秒;(2)异丙醇-磁珠混合液配制后必须再次涡旋振荡20秒以确保溶液均一;(3)每处理6-10个样本后需补充涡旋10秒以维持溶液稳定性。5. 样本裂解不完全。解决办法:加入裂解缓冲液后涡旋10秒使其充分混匀。