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Fast Magbead Tissue DNA Kit

磁珠法快速组织DNA提取试剂盒

¥598.00

CW2541S

96 preps
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推荐96通道预装型产品,CW2541S-96

该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的从新鲜或冷冻组织中提取DNA的方法。组织裂解后,DNA结合于硅基包被磁珠表面。漂洗后,高纯度的DNA洗脱于TB或去离子水中。经过纯化的DNA可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP基因分型、STR基因分型、二代测序和药物基因组学研究等。该试剂盒除了能够快速提取动物组织DNA外,还适用于血液、细胞、细菌等样本DNA的提取。

保存条件 运输条件
RT(15-30℃) 室温
Q1:该试剂盒适用于哪些样本类型?
A1:

适用于动物组织、血液、哺乳动物细胞、细菌等样本的DNA提取。

Q2:是否支持自动化提取?
A2:

支持,该试剂盒可与CWE2100 32通道核酸提取仪和CWE960 96通道核酸提取仪进行匹配使用。

Q3:Magbeads PN使用时应注意什么?
A3:

Magbeads PN严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需充分涡旋振荡以确保均匀性。

Q4:Buffer ATL和Buffer AL出现沉淀怎么办?
A4:

Buffer ATLBuffer AL有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴重新溶解。

Q5:能否用水洗脱DNA? 
A5:

若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用Buffer TB洗脱,并于-20℃保存。

Q6:提取的DNA产量低的解决办法?
A6:

DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:

1) 试剂保存不当或使用有误。 Buffer ATL或AL若出现结晶或沉淀,会显著影响裂解效率,需在56℃水浴中加热至完全溶解后再使用。同时,请确保所有缓冲液均密封保存,防止蒸发导致浓度改变。Magbeads PN磁珠在使用前务必充分涡旋使其混合均匀。

2) 样本处理或本身存在问题。 样本裂解不完全是产量低的一个主要原因。请确保组织已充分研磨,适当延长56℃的蛋白酶K消化时间,直至溶液变得清亮、无可见组织碎片。样本的储存条件也极大影响结果,应使用新鲜或妥善冻存的样本,反复冻融会严重降解DNA。同时,请确认您的样本起始量在推荐范围内。

3) 关键操作步骤执行存在偏差。 在结合步骤中,加入异丙醇和磁珠后应保证足够的孵育时间和混匀强度,确保DNA与磁珠充分结合。在洗涤和洗脱阶段,要小心操作避免吸弃上清时意外吸走磁珠。干燥步骤需要格外留意:乙醇洗涤后,磁珠应室温干燥至其表面变为哑黑色、无光泽的状态即可。过度干燥会使DNA难以重悬,导致洗脱效率急剧下降。洗脱时,使用推荐体积的Buffer TB或水,并在56℃下孵育10分钟,可以最大化地将DNA从磁珠上洗脱下来。

Q7:提取的DNA在下游应用中表现不佳该如何解决?
A7:

DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:

1) 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A6部分的解决方案。

2) 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。

3) 存在盐离子残留。解决办法:严格按说明书操作顺序加入漂洗缓冲液。 

4) DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260 nm处测定DNA浓度,精确控制使用量

Q8:提取的 DNA 纯度低的原因及该解决办法?
A8:

1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法:

1) 确保裂解充分:使用前请检查 Buffer ATL和AL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将其于56℃水浴孵育重新溶解。 

2) 去除乙醇残留:漂洗步骤完成后将离心管固定于磁力架上室温静置3-5分钟使乙醇充分挥发。

2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:核酸降解。

解决方法:

1) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。

2) 优化洗脱:若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节)。

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