miRNA Purification Kit
miRNA提取试剂盒
¥748.00
CW0627S
- + [ 现货 ]
加入购物车
- 产品介绍
- 产品参数
- 产品说明书
- FAQs
miRNA提取试剂盒专用于从各种动物组织、植物组织、细胞、血清、血浆等样本中分离纯化miRNA，还可以提取siRNA，snRNA等其他小于200 nt的小分子RNA，同时也可用于总RNA的提取。本品将酚/胍裂解技术和硅基质膜纯化技术相结合，独特的裂解液在有效抑制RNases的同时，可以通过有机抽提的方法除去细胞或组织样品中的大部分DNA和蛋白。对于一些敏感的下游实验中，如需富集miRNA可适用该试剂盒单独对miRNA进行富集。本品适用样本范围广，制备的RNA纯度高，可直接用于敏感的下游应用，如Northern Blot分析，Real-Time PCR，Microarray Analysis等。
| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| TRIzon Reagent 2-8℃ in the dark，others RT（15-30℃） | 常温 |
本试剂盒专为高效分离纯化miRNA、siRNA、snRNA等小于200 nt的小分子RNA而设计，同时也可用于总RNA的提取。纯化的RNA适用于各种敏感的下游应用，如Northern Blot、Real-Time PCR、Microarray Analysis等。
适用于组织、细胞、血浆或血清等多种样本类型。
离心后溶液不分层，主要可能由以下原因导致：
1) 混合不充分：加入氯仿后，需剧烈振荡至少15秒，以确保充分混合。
2) 氯仿比例错误：请务必确认氯仿添加量准确无误。标准比例为每使用1 mL TRIzon Reagent需加入0.2 mL氯仿。
3) 样品过载或过于粘稠：当处理蛋白、多糖或脂肪含量高的特殊样本时，裂解液会异常粘稠，阻碍分相。可在加入氯仿前，先将样品混合液于 4℃、12,000 rpm 离心5分钟，弃除沉淀，取上清进行后续操作。
若已发生不分层情况，可尝试以下补救措施：
1) 再次混合与离心：在确认氯仿已按比例添加的前提下，将反应液再次剧烈振荡，并于 4℃、12,000 rpm 条件下重新离心。
2) 追加氯仿：若高度怀疑氯仿添加量不足，可谨慎地补加少量氯仿，随后充分振荡并离心。
离心后样品分为三层（有机相、中间层、无色水相）。应小心吸取最上层的无色水相，切勿吸到中间层或下层，否则会严重污染RNA，影响纯度和下游实验。
可能的原因包括：
1) 样品降解：提取的样品应避免反复冻融。
2) 裂解不充分：加入TRIzon Reagent后需反复吹打使样本充分裂解 。
3) 洗脱体积过小：RNase-Free Wate体积不应小于30 μL，体积过小影响回收率
4) Buffer RWT和Buffer RW2未按试剂瓶标签加入相应体积的无水乙醇：Buffer RWT和Buffer RW2第一次使用前应按照试剂瓶标签说明加入相应体积的无水乙醇。
1) 对于含较多蛋白、脂肪、多糖等样品，可在加入氯仿前先进行离心（4℃, 12,000 rpm, 5分钟），弃除沉淀，取上清进行后续操作。
2) 吸取水相时需小心，可适当保留，切勿吸到中间层和下层，避免基因组污染。
3) 加入氯仿后，需在4℃下离心。
1) 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3) 配制溶液应使用无RNase的水。
4) 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
A260/A280比值低可能的原因及解决方案如下：
1) 水相吸取时被酚或蛋白污染。解决方案：吸取水相时需小心，可适当保留，切勿吸到中间层和下层，避免基因组污染。
2) 样品裂解不充分。解决方案：可以适当增加TRIzon Reagent或者降低样品投入量进行提取。
