OminiPlant RNA Kit (DNase I)

全能型植物RNA提取试剂盒(DNase I)(适用多糖多酚)

¥598.00

CW2598S

50 preps

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本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA,即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA,如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣,香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方,可使细胞中的RNA酶迅速灭活,有效去除多糖多酚对RNA提取的影响,无需苯酚、氯仿等试剂,同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化,提取的总RNA纯度高,无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。
保存条件 运输条件
DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15-30℃) 常温
Q1:Buffer RLS 出现沉淀怎么办?
A1:

Buffer RLS 如果产生沉淀,请加热使其溶解后室温放置。

Q2:如何预防RNase污染?
A2:

1) 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。

2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。

3) 配制溶液应使用无RNase的水。

4) 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

Q3:加入无水乙醇后出现沉淀正常吗?
A3:

正常。加入无水乙醇后,可能有少量沉淀物析出,不影响后续实验。

Q4:提取的RNA中有DNA污染怎么办?
A4:

本试剂盒提供柱上DNase I消化功能,可有效去除基因组DNA污染。请在步骤6-7中配制并加入DNase I混合液,20-30℃孵育15分钟,即可高效清除DNA残留。

Q5:样本量可以调整吗?
A5:

1) 对于含水量高的样本(如西瓜、西红柿),可增加至 200 mg;

2) 对于富含淀粉或成熟叶片,可增加 Buffer RLS 用量至 700 μL

Q6:提取的RNA产量低的原因及解决办法?
A6:

RNA提取产量低可能由多种原因导致。常见原因包括:

1) 起始样本量不足或过多、样本本身RNA含量低或保存不当反复冻融导致降解。请确保使用新鲜或正确保存的样本,并将起始量控制在推荐范围内。

2) 裂解不充分会严重影响产量,组织需在液氮中充分研磨。同时需警惕RNase污染,应全程使用无RNase耗材,操作时佩戴手套并勤换。

3) 实验操作存在问题:Buffer RLS中务必按比例添加β-巯基乙醇;Buffer RW2使用前应按试剂瓶标签加入相应体积的无水乙醇;各步骤加液后需充分混匀;最后空离后可开盖晾干确保去除乙醇残留。洗脱时使用至少30 μL RNase-Free Water,室温静置2分钟,必要时可进行二次洗脱提高产量。

Q7:提取的RNA纯度低(A260/A280或A260/A230比值异常)的原因及解决办法?
A7:

1) 蛋白污染(A260/A280偏低):裂解不充分或酚类物质残留可能导致蛋白污染。确保组织在液氮中充分研磨;裂解后充分离心取上清;Buffer RLS中务必按1mL加20 μL的比例添加β-巯基乙醇。

2) 有机溶剂或盐残留(A260/A230偏低):漂洗步骤不彻底或乙醇残留可能导致杂质残留。严格按说明使用Buffer RW2(首次使用前需加入无水乙醇);最后空离后可开盖晾干吸附柱,确保乙醇完全挥发。

3) 操作或耗材问题:操作中引入污染物。全程使用无RNase枪头、离心管;避免频繁开启试剂瓶。

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