提取的RNA产量低的原因及解决办法?
0 时间:2025-09-08
RNA提取产量低可能由多种原因导致。常见原因包括:
1) 起始样本量不足或过多、样本本身RNA含量低或保存不当反复冻融导致降解。请确保使用新鲜或正确保存的样本,并将起始量控制在推荐范围内。
2) 裂解不充分会严重影响产量,组织需在液氮中充分研磨。同时需警惕RNase污染,应全程使用无RNase耗材,操作时佩戴手套并勤换。
3) 实验操作存在问题:Buffer RLS中务必按比例添加β-巯基乙醇;Buffer RW2使用前应按试剂瓶标签加入相应体积的无水乙醇;各步骤加液后需充分混匀;最后空离后可开盖晾干确保去除乙醇残留。洗脱时使用至少30 μL RNase-Free Water,室温静置2分钟,必要时可进行二次洗脱提高产量。