DNA提取产量低解决办法?
0 时间:2025-09-08
DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:
1. 裂解缓冲液出现沉淀。解决办法:用前请先检查Buffer SL和Buffer GL是否出现沉淀,如有沉淀,可在56℃水浴几分钟重新溶解。
2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。
3. 漂洗过程中出现DNA损失。解决办法:Buffer GW1和Buffer GW2使用前应按试剂瓶标签加入无水乙醇。
4. 磁珠悬浮液及异丙醇-磁珠混合物混匀不充分。解决办法:Magbeads PN使用前需充分涡旋混匀;每处理6-10个样本后需补充涡旋10秒以维持溶液稳定性。
5. 样本裂解不完全。解决办法:对于骨骼、牙齿等坚硬样本,必须通过液氮或研磨器充分研磨以增大裂解表面积。同时,必须严格遵循特定的孵育条件,例如难裂解样本需56℃过夜孵育,并在蛋白酶K消化后进行70-80℃加热以彻底灭活酶并促进裂解。此外,每个涡旋步骤都应充分,确保样本完全分散在裂解液中,避免形成团块。