DNA产量低的可能原因及解决方案?

0 时间:2025-10-10

可能原因包括:

1) Proteinase K失活(因加样顺序错误)。解决办法:必须最先加入Proteinase K,再加样本和Buffer CTL。

2) 样品质量不佳。解决办法:样品应避免反复冻融。

3) 磁珠结合不充分。解决办法:使用前必须涡旋振荡Magbeads ZN至少30秒,确保磁珠完全重悬。裂解结合步骤必须室温振荡20分钟,确保磁珠悬浮。处理多个样本时,应每隔几个样本重新混匀一次,防止磁珠沉降。

4) 洗脱效率不足。解决办法:使用预热的RNase-Free Water(55–60℃),并确保涡旋重悬后,1600rpm振荡洗脱10分钟。

5) 磁珠在晾干过程中过度干燥。解决办法:乙醇挥发(晾干)时间不宜过长。待管壁液体挥发后,观察到磁珠表面由湿润反光变为哑光、且无干裂状时即可。

6) 漂洗液配制错误。解决办法:Buffer GCW2第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇并做好标记。

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