提取的 DNA 纯度低的原因及该解决办法?
2 时间:2025-08-26
1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白、血红素或乙醇残留导致污染。解决方法:
1) 确保裂解充分:使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
2) 彻底洗涤:对难处理的血液样本(如小鼠、猴子),重复Buffer GW1洗涤步骤,以彻底去除血红素。
3) 去除乙醇残留:吸附柱空离2分钟后将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:RNA残留或核酸降解。
解决方法:
1) 完成步骤3后,可向其中加入4 μL RNase A(100 mg/mL)溶液,震荡15 秒,室温放置5 分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:CW0601S。
2) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。
3) 优化洗脱:改用Buffer GE洗脱,减少小片段核酸干扰。