使用FlexGen Blood DNA Kit提取DNA时产量低怎么办?
2 时间:2025-08-26
DNA产量低通常可通过以下方法解决:
1. 样本处理
(1)样本反复冻融:血液样品反复冻融,会导致提取的DNA片段较小。且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融,以免降解。
(2)凝血样本处理:仅使用未凝固部分,凝固部分会影响裂解效果。
(3)充分混匀:加入Buffer FG1后必须涡旋混匀至沉淀完全分散。
2. 实验操作
(1)沉淀回收:弃上清时缓慢倾倒,必要时延长离心时间(如12,000×g离心10分钟)。
(2)沉淀充分:异丙醇加入后至少颠倒混匀20次,白细胞含量低时更需充分混合。
(3)适度干燥:避免过度干燥导致DNA难于溶解。
3. 实验优化
(1)Buffer FG2/Proteinase K混合液需现配现用(1小时内)。
(2)DNA未完全溶解时可65℃延长孵育或室温过夜。