NuClean Plant Genomic DNA Kit

新型植物基因组DNA提取试剂盒(适用多糖多酚)

¥398.00

CW0531S

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本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,适合从各种不同的新鲜或冻存植物组织中提取基因组DNA,并可最大限度去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/氯仿抽提,操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠,适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
保存条件 运输条件
RT(15-30℃) 常温
Q1:是否可以将Buffer LP1与RNase A预混?
A1:

不可以。

Q2:样品应如何处理?
A2:

取约100 mg新鲜植物组织或20 mg干燥组织,用液氮充分研磨成粉末,避免反复冻融,否则可能导致DNA断裂或得率下降。

Q3:加入Buffer LP3后出现沉淀是否正常?
A3:

是正常的,立即混匀即可,沉淀不影响后续实验。

Q4:吸附膜变绿怎么办?
A4:

如果吸附膜呈现绿色,可向吸附柱中加入500 μL无水乙醇,离心1分钟,再进行后续步骤。

Q5:能否用水洗脱DNA?
A5:

若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用Buffer GE,并于-20℃保存。

Q6:如何预防吸附柱堵塞?
A6:

预防堵塞需充分研磨组织并确保转移上清时避免吸入沉淀。

Q7:提取的DNA产量低的解决办法?
A7:

(1) 样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准。

(2) 样品保存时要尽可能的避免反复冻融。

(3) 样本应进行充分裂解:确保组织在液氮中充分研磨,并充分涡旋混合。

(4) Buffer LP3和Buffer GW2中无水乙醇添加量不准确或漏加:应按照试剂瓶标签正确添加无水乙醇。

(5) 确保无乙醇残留:空离后将吸附柱开盖室温静置数分钟,彻底挥发乙醇。6 洗脱不充分: DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。

Q8:提取的 DNA 纯度低的原因及该解决办法?
A8:

1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法:

1) 确保裂解充分:使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,于56℃水浴孵育至重新溶解。 

2) 去除乙醇残留:吸附柱空离2分钟后将吸附柱开盖置于室温数分钟,以彻底晾干。

2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:核酸降解。

解决方法:

1) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。

2) 优化洗脱:若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节)。

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