适用于从动物细胞及组织中高效提取总RNA。

1) 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。

2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。

3) 配制溶液应使用无RNase的水。

4) 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。

本试剂盒提供柱上DNase I消化功能，可有效去除基因组DNA污染。请在步骤7-9中配制并加入DNase I混合液，20-30℃孵育15分钟，即可高效清除DNA残留。

正常。加入无水乙醇后，可能有少量沉淀物析出，不影响后续实验。

RNA提取产量低可能由多种原因导致。常见原因包括：

1) 起始样本量不足或过多、样本本身RNA含量低或保存不当反复冻融导致降解。请确保使用新鲜或正确保存的样本，并将起始量控制在推荐范围内。

2) 裂解不充分会严重影响产量，组织需在液氮中充分研磨，细胞应反复吹打，使其充分裂解。同时需警惕RNase污染，应全程使用无RNase耗材，操作时佩戴手套并勤换。

3) 实验操作存在问题：Buffer RL中务必按比例添加β-巯基乙醇；Buffer RW2使用前应按试剂瓶标签加入相应体积的无水乙醇；各步骤加液后需充分混匀；最后空离后开盖晾干确保去除乙醇残留。洗脱时使用至少30 μL RNase-Free Water，室温静置1-2分钟，必要时可进行二次洗脱提高产量。

1) 蛋白污染（A260/A280偏低）：裂解不充分或酚类物质残留可能导致蛋白污染。确保组织在液氮中充分研磨，细胞完全分散在Buffer RL中；裂解后充分离心取上清；Buffer RL中务必按1mL加10 μL的比例添加β-巯基乙醇。

2) 有机溶剂或盐残留（A260/A230偏低）：漂洗步骤不彻底或乙醇残留可能导致杂质残留。严格按说明使用Buffer RW2（首次使用前需加入无水乙醇）；最后空离后开盖晾干吸附柱2-3分钟，确保乙醇完全挥发。

3) 样本类型特殊：脂肪组织或脑组织等样本中可能含大量有机物。建议减少起始样本量。

4) 操作或耗材问题：操作中引入污染物。全程使用无RNase枪头、离心管；避免频繁开启试剂瓶。