2×Super Pfx Master Mix(Dye)

高保真酶预混液

¥218.00

CW2969S

1 mL
5 mL

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本品为由Super Pfx DNA Polymerase、Mg2+ 、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Super Pfx DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,该酶具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,克服了普通Pfu酶扩增能力差、产量低和扩增速度慢的缺陷,具有扩增能力强,保真度高,扩增速度快等优点,极大地缩短了反应时间。MasterMix的配方使整个反应体系非常稳定,适用于各种片段及模板的扩增。扩增得到的PCR产物的3′端不带有“A”碱基,可直接克隆于平末端载体中,如需进行T/A克隆,需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品适用于基因克隆、二代建库扩增、基因定点突变、SNP等扩增实验。2×MasterMix中已加电泳指示剂,PCR反应结束后可直接进行琼脂糖凝胶电泳检测,操作方便
保存条件 运输条件
-20℃ 冰袋
Q1:高保真酶扩增保真性差,存在突变。
A1:

1)检查模板,若模板是质粒,建议送质粒去测序;

2)若模板是cDNA,建议重复实验,如果仍有突变,可能是cDNA有问题,建议重新制备cDNA,制备cDNA前检测RNA的完整度及纯度。

3)切胶回收过程中避免长时间在紫外光下照射。

Q2:CW2969和CW2965的区别。
A2:

CW2969含有染料,CW2965不含染料。

Q3:扩增特异性差,非特异性扩增。
A3:

1)引物设计不够优化,必要时重新设计引物。

2)模板降解或过量,模板不纯,被污染,需重新制备模板。

3)反应程序不够优化。如果出现比目的条带小的杂带,可通过提高退火温度,降低循环数调整;如果出现比目的条带大的杂带,可缩短延伸时间、降低循环数。酶量加入过多。

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