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rProtein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit

ProteinA/G免疫(共)沉淀试剂盒

¥1488.00

CW8301M

50 T

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rProtein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit 是一款能够高效完成免疫沉淀(IP)及免疫共沉淀(Co-IP)实验的试剂盒。其包含高性能 rProtein A/G MagPoly Beads,能够实现快速便捷的磁性分离。试剂盒内经过优化的缓冲液,为免疫沉淀实验提供了良好的反应条件,增强了免疫沉淀实验的稳定性。聚合物磁珠的配体是重组蛋白 A/G,同时拥有蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域,具有更广的抗体亚型结合范围。试剂盒的洗脱方式多样,既可以用低 pH 的洗脱液将免疫复合物从蛋白 A/G 磁珠上洗脱,也可以使用电泳上样缓冲液以变性条件洗脱免疫复合物,直接进行后续检测分析。

本产品可广泛应用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等样品中抗原的免疫沉淀反应。

保存条件 运输条件
2-8℃,Freezing is prohibited 冰袋
Q1:为什么抗原没有沉淀下来?
A1:

可能原因:

①样品中抗原过少,建议通过SDS-PAGE或Western Blot验证蛋白表达或裂解效率,将抗原量提高至推荐用量。

②抗体与抗原结合力太弱或无法结合,建议优化Lysis/Wash Buffer,或更换结合力/特异性更强的抗体,或选择另一种识别不同表位的抗体。

③蛋白质被降解,建议加入蛋白酶抑制剂,或对温度敏感的抗原,尽量在4C或并于条件下进行实验操作。

Q2:洗脱液中没有目标抗原?
A2:

可能原因:

①蛋白可能是包涵体没有在上清中,建议通过SDS-PAGE检测裂解液分析上清中是否含有目的蛋白,包涵体蛋白需要按照包涵体蛋白的纯化方式。

②表达量太低,建议优化表达条件。

③洗脱条件过于温和,建议延长洗脱液孵育时间,或使用强度更高的洗脱液

Q3:洗脱下的抗体条带干扰目标抗原条带判断怎么办?
A3:

若抗原接近25 kDa50 kDa,建议SDS-PAGE前请勿还原样品,抗体条带则迁移至160 kDa附近;进行蛋白免疫印迹时,选择使用不同种属来源的抗体(例如IP抗体为鼠源的,那么后续WB的抗体可以选择免源的);改用直接法将抗体交联至磁珠。

Q4:非特异性条带多怎么办?
A4:

可能原因:

①有非特异性的蛋白结合在磁珠上,建议优化漂洗液组分,例如补加50-350 mM Nacl。

②进行蛋白免疫印迹时,清洗不充分,建议增加清洗次数。

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