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Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒

¥288.00

CW9106S

50 T

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细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒（Cell  Cycle  and  Apoptosis  Analysis  Kit）是一种采用经典的碘化丙啶（Propidium Iodide，即PI）染色方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。


碘化丙啶是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。


碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化（DNA fragmentation）导致部分基因组 DNA 片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。


细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。


本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测。

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-20±5℃，away from light 冰袋
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Q1：这款试剂盒是否可以同时检测细胞周期和细胞凋亡？
A1：

可以。本试剂盒通过PI对DNA进行染色，基于DNA含量分析细胞周期（G1/S/G2-M期），并可识别DNA含量低于G1期细胞的亚G1峰（Sub-G1），用以指示凋亡细胞。

Q2：流式检测时CV值过高如何改善？
A2：

确保使用低速进样，并通过QC校准仪器；使用预冷的75%乙醇过夜固定；将细胞量控制在2×10⁵~1×10⁶之间。

Q3：为什么结果中缺少G2/M期峰？
A3：

可能由于细胞状态不佳、密度过高发生接触抑制或培养条件不理想；对于无增殖能力的细胞（如某些原代细胞），亦无法观察到G2/M期。

Q4：出现Sub-G1峰是什么原因？
A4：

Sub-G1峰代表DNA含量低于G1期的细胞群体，是细胞发生凋亡或坏死的特征；但需在样本制备过程中轻柔操作，以排除机械损伤造成的假阳性。

Q5：细胞周期各时期百分比之和不足100%是何原因？
A5：

通常因圈门时包含了细胞粘连体，或所选拟合模型不适用；建议在分析前排除粘连细胞，并尝试更换不同的拟合软件模块。

Q6：细胞固定时能否直接加入75%乙醇？
A6：

不可以。直接加入高浓度乙醇会导致细胞成团和固定效果差。正确步骤是先用PBS充分重悬细胞，再逐滴加入无水乙醇至终浓度为75%。

Q7：流式周期结果中G2/G1的比值有何意义？
A7：

G2/G1峰的荧光强度比值理论应为2，是仪器线性度和样本制备质量的内参；该比值显著偏离2时，提示DNA染色或仪器校准可能存在问题。

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