Fast Magbead Free-Circulating DNA Maxi Kit

快速磁珠法大体积游离DNA提取试剂盒

¥1098.00

CW3720S

2 mL×48 preps

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该试剂盒适用于从1-5 mL血浆、血清、尿液等无细胞体液中纯化回收游离DNAFreecirculating / Cell-free DNA)。试剂盒将常温裂解与核酸吸附合为一步,无冰浴过程,无需暂停加入结合液和磁珠,大幅度简化了操作步骤。高盐时,游离DNA结合于硅基包被的磁珠表面。漂洗后,游离DNA洗脱于无酶水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。试剂盒具有提取效率高,重复性好,操作过程简单、高效和快速等特点,纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可用于定量PCR、二代测序文库构建等下游常规实验。



高得率提取产量高,目的小片段占比高

广兼容适用于从1-5 mL血浆、血清、尿液等无细胞体液纯化高质量游离DNA

操作便捷裂解和结合合为一步,无需冰浴与暂停。

可自动化兼容手动提取和自动化高通量提取。


1. 高浓度,高得率

【实验一】分别使用康为世纪CW3720S与竞品T的磁珠法游离DNA大量提取试剂盒提取62 mL血浆,提取后的核酸分别使用Qubit进行浓度测定,结果如下。


图1:两种试剂盒提取的血浆游离核酸浓度

实验结果表明康为世纪CW3720S 提取血浆游离核酸浓度优于竞品T


2. 优秀的片段分布

【实验二】提取后的核酸分别使用Qsep100检验片段分布情况,结果如下:


图2:提取的核酸片段分布图

实验结果表明与浓度结果对应,康为世纪CW3720S提取获得的核酸主峰显著优于竞品T。


3. 高质量文库

【实验三】提取后的核酸分别以等ng样本量投入,并使用康为世纪CW3045S DNA文库快速制备试剂盒进行文库构建,出库产物分别使用Qubit荧光计进行浓度测定,结果如下:

实验结果表明投入等ng核酸进行预建库构建,康为世纪CW3720S优于竞品T的出库浓度。


4. 良好的测序数据

【实验四】根据文库产物浓度进行混样,使用杂交捕获试剂盒等试剂进行杂交捕获文库构建,然后在MGI平台进行杂交文库测序。测序结果如下:

实验结果表明测序质控数据显示,康为世纪CW3720S略优于竞品T



保存条件 运输条件
Magbeads ZN 2-8℃,其余组分室温(10-30℃) Magbeads ZN 冰袋运输,其余组分室温运输
Q1:CW3720S适用于哪些类型的样本?
A1:

适用于从 1–5 mL 血浆、血清、尿液等无细胞体液 中提取游离DNA

Q2:DNA产量低的可能原因及解决方案?
A2:

可能原因包括:

1) Proteinase K失活(因加样顺序错误)。解决办法:必须最先加入Proteinase K,再加样本和Buffer CTL。

2) 样品质量不佳。解决办法:样品应避免反复冻融。

3) 磁珠结合不充分。解决办法:使用前必须涡旋振荡Magbeads ZN至少30秒,确保磁珠完全重悬。裂解结合步骤必须室温振荡20分钟,确保磁珠悬浮。处理多个样本时,应每隔几个样本重新混匀一次,防止磁珠沉降。

4) 洗脱效率不足。解决办法:使用预热的RNase-Free Water(55–60℃),并确保涡旋重悬后,1600rpm振荡洗脱10分钟。

5) 磁珠在晾干过程中过度干燥。解决办法:乙醇挥发(晾干)时间不宜过长。待管壁液体挥发后,观察到磁珠表面由湿润反光变为哑光、且无干裂状时即可。

6) 漂洗液配制错误。解决办法:Buffer GCW2第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇并做好标记。

Q3:Magbeads ZN使用应注意什么?
A3:

Magbeads ZN严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。

Q4:Buffer CTL/CTW 出现沉淀怎么办?
A4:

使用前请先检查Buffer CTLBuffer CTW是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在50℃水浴几分钟,即可恢复澄清。

Q5:是否支持自动化提取?
A5:

支持康为CWE240全自动核酸提取仪。

Q6:不同样本体积的试剂用量如何调整?
A6:

详见说明书第4页附表,按样本体积(1–5 mL)调整各试剂用量。

Q7:使用CW3720纯化的DNA在下游应用中表现不佳该如何解决?
A7:

DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:

1) 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A2部分的解决办法。

2) 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。

3) 存在盐离子残留。解决办法:严格按说明书操作顺序进行漂洗,漂洗完成后确保乙醇完全挥发。 

4) DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260 nm处测定DNA浓度,精确控制使用量。

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