 
                Fast Magbead Free-Circulating DNA Maxi Kit
快速磁珠法大体积游离DNA提取试剂盒
¥1098.00
CW3720S
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                    该试剂盒适用于从1-5 mL血浆、血清、尿液等无细胞体液中纯化回收游离DNA(Freecirculating / Cell-free DNA)。试剂盒将常温裂解与核酸吸附合为一步,无冰浴过程,无需暂停加入结合液和磁珠,大幅度简化了操作步骤。高盐时,游离DNA结合于硅基包被的磁珠表面。漂洗后,游离DNA洗脱于无酶水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。试剂盒具有提取效率高,重复性好,操作过程简单、高效和快速等特点,纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可用于定量PCR、二代测序文库构建等下游常规实验。

▪ 高得率:提取产量高,目的小片段占比高
▪ 广兼容:适用于从1-5 mL血浆、血清、尿液等无细胞体液纯化高质量游离DNA。
▪ 操作便捷:裂解和结合合为一步,无需冰浴与暂停。
▪ 可自动化:兼容手动提取和自动化高通量提取。

1. 高浓度,高得率
【实验一】分别使用康为世纪CW3720S与竞品T的磁珠法游离DNA大量提取试剂盒提取6例2 mL血浆,提取后的核酸分别使用Qubit进行浓度测定,结果如下。

图1:两种试剂盒提取的血浆游离核酸浓度
实验结果表明:康为世纪CW3720S 提取血浆游离核酸浓度优于竞品T。
2. 优秀的片段分布
【实验二】提取后的核酸分别使用Qsep100检验片段分布情况,结果如下:

图2:提取的核酸片段分布图
实验结果表明:与浓度结果对应,康为世纪CW3720S提取获得的核酸主峰显著优于竞品T。
3. 高质量文库
【实验三】提取后的核酸分别以等ng样本量投入,并使用康为世纪CW3045S DNA文库快速制备试剂盒进行文库构建,出库产物分别使用Qubit荧光计进行浓度测定,结果如下:

实验结果表明:投入等ng核酸进行预建库构建,康为世纪CW3720S优于竞品T的出库浓度。
4. 良好的测序数据
【实验四】根据文库产物浓度进行混样,使用杂交捕获试剂盒等试剂进行杂交捕获文库构建,然后在MGI平台进行杂交文库测序。测序结果如下:

实验结果表明:测序质控数据显示,康为世纪CW3720S略优于竞品T。
 
                     
                    | 保存条件 | 运输条件 | 
|---|---|
| Magbeads ZN 2-8℃,其余组分室温(10-30℃) | Magbeads ZN 冰袋运输,其余组分室温运输 | 
 
                    适用于从 1–5 mL 血浆、血清、尿液等无细胞体液 中提取游离DNA
可能原因包括:
1) Proteinase K失活(因加样顺序错误)。解决办法:必须最先加入Proteinase K,再加样本和Buffer CTL。
2) 样品质量不佳。解决办法:样品应避免反复冻融。
3) 磁珠结合不充分。解决办法:使用前必须涡旋振荡Magbeads ZN至少30秒,确保磁珠完全重悬。裂解结合步骤必须室温振荡20分钟,确保磁珠悬浮。处理多个样本时,应每隔几个样本重新混匀一次,防止磁珠沉降。
4) 洗脱效率不足。解决办法:使用预热的RNase-Free Water(55–60℃),并确保涡旋重悬后,1600rpm振荡洗脱10分钟。
5) 磁珠在晾干过程中过度干燥。解决办法:乙醇挥发(晾干)时间不宜过长。待管壁液体挥发后,观察到磁珠表面由湿润反光变为哑光、且无干裂状时即可。
6) 漂洗液配制错误。解决办法:Buffer GCW2第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇并做好标记。
Magbeads ZN严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。
使用前请先检查Buffer CTL和Buffer CTW是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在50℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
支持康为CWE240全自动核酸提取仪。
详见说明书第4页附表,按样本体积(1–5 mL)调整各试剂用量。
DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:
1) 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A2部分的解决办法。
2) 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。
3) 存在盐离子残留。解决办法:严格按说明书操作顺序进行漂洗,漂洗完成后确保乙醇完全挥发。
4) DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260 nm处测定DNA浓度,精确控制使用量。
 400-0688-426
400-0688-426                 
                         英文
                        英文
                     
             分子原料酶
                                        分子原料酶
                                     分子原料酶
分子原料酶                                         
                                                                                             样本采集与保存
样本采集与保存                                         核酸提取
核酸提取                                         高通量建库测序
高通量建库测序                                         蛋白与细胞
蛋白与细胞                                         耗材与仪器
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单分子纳米孔测序                                         基因合成
基因合成                                         引物探针合成
引物探针合成                                         体外诊断
体外诊断                                         健康服务
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