1) 脱蜡不彻底：确保按说明书步骤操作，充分涡旋和离心。

2) 交联未充分逆转：确保90℃孵育1小时。

3) 乙醇未添加：确认已按试剂瓶标签说明向漂洗缓冲液1和2中加入相应体积的无水乙醇。

4) 洗脱问题：尝试用预热的洗脱缓冲液，并室温静置5分钟再离心。或进行二次洗脱。