手动提取RNA产量低的原因及解决办法?
0 时间:2025-09-11
1) 组织在福尔马林中固定时间过长。解决办法:确保组织固定时间在14-24小时以内。
2) 脱蜡不彻底。解决办法:确保按说明书步骤操作,充分涡旋和离心。
3) 磁珠悬浮液未充分混匀。解决办法:磁珠悬浮液使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。处理多个样本时,应每隔几个样本重新混匀一次,防止磁珠沉降。
4) 磁珠在晾干过程中过度干燥。解决办法:乙醇挥发(晾干)时间不宜过长。待管壁液体挥发后,观察到磁珠表面由湿润反光变为哑光、且无干裂状时即可。
5) 洗脱效率不足。解决办法:适当增加洗脱体积或延长洗脱时间,并确保在56℃条件下进行振荡洗脱。
6) 乙醇未添加:确认已按试剂瓶标签说明向漂洗缓冲液2中加入相应体积的无水乙醇。