荧光背景高可能由哪些因素引起?

0 时间:2025-11-13

①支原体污染:可以使用支原体染色检测试剂盒验证;

②TdT酶反应时间过长,可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液将TdT酶稀释2-5倍后再按照说明书操作,稀释后的TdT酶仅供当日使用;

③处于高速分裂和增殖状态中的细胞,有时也会出现细胞核中的DNA 断裂。建议: 在非高增殖期取样检测;

④有些试剂或细胞存在自发荧光,选择染料时要避开自发荧光的颜色;

⑤DAB 孵育时间过长,减少DAB 染色时间;

Biotin-X-dUTP 的非特异性结合,在TdT酶反应之后,再用含0.1% Triton X-100 1 mg/mlBSA PBS 洗三次。

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