标记效率偏低可能由哪些因素引起?
0 时间:2025-11-13
①乙醇、甲醇或甲醛(市面上购买的甲醛大多含有甲醇) 固定的样品标记效率较低(因为在固定时染色质未能与蛋白质交联,而在操作中丢失),采用推荐的固定液;
②固定时间过长,导致交联程度过高,减少固定时间;
③贴壁细胞如果使用药物诱导凋亡,会细胞皱缩,贴壁黏附力降低,导致凋亡细胞容易脱落。建议:在凋亡诱导结束后,可以对多孔板进行1000 g离心5 min,然后再吸出培养基并用PBS洗涤。如果没有适合的离心机,请注意操作轻缓,防止发生凋亡的细胞在洗涤时被洗去。后续整个操作也需要轻缓。
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