出现非特异标记可能由哪些因素引起?
0 时间:2025-11-13
①有些细胞,比如平滑肌核酸酶或聚合酶活性水平较高,使得DNA全部被切断,易导致假阳性。建议:取出细胞后要立即固定并充分固定,以阻止这些酶的活性,同时设置阴性对照;
②固定液浓度过高或过低,导致中心部分细胞固定效果不佳,而使得中心部细胞自溶、DNA链出现不规则断裂,产生假阳性。建议:推荐使用4%多聚甲醛;
③TdT酶反应时间过长或Tunel反应过程中反应液发生蒸发或渗漏,细胞表面不能保持湿润注意控制反应时间,并确保TdT酶反应液能很好地覆盖样品;
④有些试剂或细胞存在自发荧光,选择染料时要避开自发荧光的颜色。
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