关键确保菌液与Buffer RES/LYS充分混合裂解。不完全混合会导致裂解液粘稠，进而堵塞滤膜基质。建议：（1）加入Buffer RES后完全重悬细胞；（2）加入Buffer LYS后充分混匀；（3）Buffer NEU加入后充分混合使细胞碎片形成白色沉淀上浮。若白色沉淀未上浮，可用无菌枪头将其从管壁剥离，否则会积聚在滤膜上导致堵塞。使用CWBlue试剂可确保获得最佳混合效果。