使用瓶装型产品提取的DNA产量低的解决办法?

2 时间:2025-08-26

DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:

1. 裂解缓冲液出现沉淀。解决办法:用前请先检查裂解缓冲液是否出现沉淀,如有沉淀,可在56℃水浴几分钟重新溶解。

2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。

3. 漂洗过程中出现DNA损失。解决办法:漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2使用前应按试剂瓶标签加入无水乙醇。

4. 磁珠悬浮液及异丙醇-磁珠混合物混匀不充分。解决办法:(1) 磁珠悬浮液使用前需充分涡旋混匀至少20秒;(2)异丙醇-磁珠混合液配制后必须再次涡旋振荡20秒以确保溶液均一;(3)每处理6-10个样本后需补充涡旋10秒以维持溶液稳定性。

5. 样本裂解不完全。解决办法:加入裂解缓冲液后涡旋5秒,56℃水浴15分钟(期间涡旋2次),使其充分混匀。

6. 冷冻抗凝血液样本解冻后混合不当。解决办法:冷冻抗凝血液需提前在室温下放置,融化混匀。

7. 起始物料的储存不当。解决办法:使用新鲜或妥善保存的样本(避免反复冻融)。

8. 样本投入量多。解决办法:血液体积大于或小于200 μL,蛋白酶K、裂解缓冲液和异丙醇与磁珠混合物的用量需按比例调整。

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