可能的原因包括：

1. 样品降解：提取的样品应避免反复冻融。

2. 样本量过大：样品体积不应超过TRIzon体积的10% 。

3. 裂解不充分：加入TRIzon后需反复吹打使样本充分裂解 。

4. 洗脱体积过小：RNase-Free Wate体积不应小于30 μL，体积过小影响回收率。

5. Buffer RW2未按试剂瓶标签加入相应体积的无水乙醇：Buffer RW2第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。