可能的原因包括：

1) 样品降解：提取的样品应避免反复冻融。

2) 裂解不充分：加入TRIzon Reagent后需反复吹打使样本充分裂解 。

3) 洗脱体积过小：RNase-Free Wate体积不应小于30 μL，体积过小影响回收率

4) Buffer RWT和Buffer RW2未按试剂瓶标签加入相应体积的无水乙醇：Buffer RWT和Buffer RW2第一次使用前应按照试剂瓶标签说明加入相应体积的无水乙醇。