FlexGen Blood DNA Kit (0.1-20mL)

血液基因组非柱式提取试剂盒(0.1-20 ml)

¥798.00

CW0544M

200 mL

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本试剂盒提供了一种快速、灵活的方法,适用于提取新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的样品)总DNA,包括基因组DNA和线粒体DNA。本品可以灵活处理0.1-20 ml的全血,采用非离心柱的方法,无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂,有效去除蛋白、色素、脂类及其它抑制性杂质污染。整个过程在一个管中操作,减少了污染及样本混淆的风险。提取的DNA产量高、质量好,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot以及文库构建等实验。产品特点● 纯度高:提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。● 提取量大:可从0.1-20 ml的全血中提取DNA,无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂。● 兼容性强:适用于处理各种血液和细胞样本。
保存条件 运输条件
Buffer FG1 2-8℃, others RT (15-30℃) 常温
Q1:使用FlexGen Blood DNA Kit提取DNA时产量低怎么办?
A1:

DNA产量低通常可通过以下方法解决:

1. 样本处理

(1)样本反复冻融:血液样品反复冻融,会导致提取的DNA片段较小。且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融,以免降解。

(2)凝血样本处理:仅使用未凝固部分,凝固部分会影响裂解效果。

(3)充分混匀:加入Buffer FG1后必须涡旋混匀至沉淀完全分散。

2. 实验操作

(1)沉淀回收:弃上清时缓慢倾倒,必要时延长离心时间(如12,000×g离心10分钟)。

(2)沉淀充分:异丙醇加入后至少颠倒混匀20次,白细胞含量低时更需充分混合。

(3)适度干燥:避免过度干燥导致DNA难于溶解。

3. 实验优化

(1)Buffer FG2/Proteinase K混合液需现配现用(1小时内)。

(2)DNA未完全溶解时可65℃延长孵育或室温过夜。

Q2:是否可以将Proteinase K和Buffer FG2预混?
A2:

不可以。

Q3:提取的 DNA 纯度低,影响下游实验结果该如何解决?
A3:

主要时以下两方面原因:

1.蛋白去除不彻底。需确保Proteinase K按说明书正确配制,FG2/蛋白酶K混合液应现配现用并在1小时内使用,65℃处理至样本变橄榄绿色,必要时可  延长处理时间。

2.存在乙醇残留。乙醇洗涤后,沉淀至少干燥5分钟,但要避免过度干燥。

Q4:血液样品该如何储存?
A4:

(1)短期保存:已加入抗凝剂的血液样品可在2-8℃储存最多10天,对于某些实验例如Southern杂交等,需要得到完整全长的基因组DNA,请将血液样品在2-8℃储存不超过3天,此时基因组DNA的降解程度较轻。

2)长期保存:已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA,推荐使用EDTA作为抗凝剂)。

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