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T4 DNA Ligase for NGS

T4 DNA连接酶(二代测序专用)

¥638.00 ¥798.00

CW2701S

1500 U
7500 U

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T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA Ligase基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化而来的,催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基基团以磷酸二酯键结合反应。该酶可催化平末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交中的单链中的单链切口,但是对于单链核苷酸,没有活性。
保存条件 运输条件
-20℃ 干冰运输(当环境温度低于10℃时,3天内到达可冰袋运输)
Q1:DNA提取产量低的原因及解决办法?
A1:

DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:

1. 缓冲液储存温度低(<15℃),可能会导致形成沉淀。解决办法:用前请先检查Buffer ATL、Buffer AL是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀,可在37℃水浴几分钟,溶液恢复澄清。若因温度原因,仍有结晶和沉淀,可继续37℃水浴,直至溶液恢复澄清。

2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。

3. 磁珠未充分混匀。解决办法:使用磁珠时,需充分涡旋混匀至少30秒以混匀磁珠,每加6-10个样本再次涡旋10秒。

4. 样本裂解不完全。解决办法:适当延长Proteinase K的孵育时间。

5. 冻存血液样本解冻后混合不当。解决办法:在37℃水浴中快速解冻冷冻血液样本,并轻微搅拌,以确保充分混合

6. 由于不溶物堵塞枪头。解决办法:为了去除不溶性物质,将样品在20,000×g下离心3分钟,并将上清转移到新的样品管中。

7. 起始物料的储存不当。解决办法:使用新鲜或妥善保存的样本(避免反复冻融)。

8. 样本投入量太多。解决办法:减少样本的投入量。

9. Buffer EB冲洗期间DNA丢失。解决办法:当磁珠被磁铁分离吸弃溶液时,避免接触到磁珠。

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