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2×HiAmp PCR Master Mix (Dye)

2×高效PCR预混液

¥158.00 ¥698.00

CW3339M

10 mL
1 mL
50 mL

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本产品为2×预混型试剂,是由HiAmp DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs、PCR稳定剂和增强剂组成。HiAmp DNA Polymerase是由抗体修饰的热启动酶,可进行高特异性的Hot Start PCR。该酶同时具有5’-3’聚合酶活性和3’-5’外切酶活性,保真性约为Taq DNA Polymerase 的52倍,扩增产物长度可达20 kb。

此外,本产品使用了高抗逆Buffer,在粗样品的扩增上拥有出色的性能,可对普通PCR酶难以扩增的含多种PCR抑制物的粗样本实现有效扩增。

本产品中含有Loading Dye,PCR结束后可直接进行凝胶电泳分析。


高抗逆性:对粗提的动植物组织核酸等模板的扩增能力非常强,对血液、微生物等样本,无需抽提核酸,直接添加到反应液中扩增即可获得充足的目的产物。

高扩增能力:对于短片段和经纯化的模板,延伸速度可达10-15 sec/kb;对于长片段或复杂性高的模板,延伸速度建议设置为30 sec/kb;同时对微量模板也可有效扩增。

高特异性:高效热启动酶可大幅提高扩增特异性。

高保真性:本产品保真性约为Taq DNA Polymerase 的52倍。适用于分子克隆、测序等应用。

高稳定性:本产品经过加速稳定性测试,37 ℃放置10天,产品性能不受影响。


1. 抗抑制能力强

【实验一】以小鼠鼠尾、鼠趾、鼠耳为起始样本,进行碱裂解,粗裂解产物使用CW3339直接进行PCR扩增,分别扩增0.7 kb、1.5 kb、2.8 kb三个不同大小的片段。

图1:小鼠粗裂解样本直扩产物电泳图


【实验二】以水稻叶片粗裂解产物为模板,使用CW3339直接进行PCR扩增。

图2:植物粗裂解样本直扩产物电泳图


【实验三】以血液为模板(25 μL体系加2 μL全血),使用CW3339直接进行PCR扩增。


图3:血液样本直扩产物电泳图


【实验四】以大肠杆菌菌液为模板,使用CW3339直接进行PCR扩增。

图4:菌液样本直扩产物电泳图

实验结果表明:CW3339兼容多种类型的粗样本扩增,扩增效果优异。


2. 兼容高GC/AT区域扩增

【实验五】以人基因组DNA为模板,使用CW3339分别扩增36%、68%、76%三种不同GC含量,不同片段大小的目的基因。


图5:扩增不同GC含量目的基因电泳图

实验结果表明:CW3339可以兼容高GC和高AT基因扩增,扩增效果优异。


3. 兼容多种模板类型

【实验六】分别以人基因组DNA、大肠杆菌基因组DNA、小鼠基因组DNA、人cDNA、水稻基因组DNA为模板,使用CW3339扩增多条不同长度的片段(延伸时间设置为15 sec/kb)。

图6:扩增不同模板产物电泳图

实验结果表明:CW3339可以兼容多种模板类型,不同片段长度的PCR扩增,扩增效果优异。

保存条件 运输条件
-20℃ 冰袋
Q1:该预混液扩增产物是否带“A”?
A1:

本产品扩增产物带有 3’-A,可用于TA 克隆。

Q2:该预混液是否是热启动?
A2:

本产品是由抗体修饰的热启动酶搭配高抗逆Buffer,可进行高特异性的 Hot Start PCR

Q3:该预混液推荐应用范围?
A3:

非常适合常规PCR扩增与菌液鉴定类实验,兼容粗裂解的动植物组织等。

Q4:扩增效率低,未产生目的条带,非特异严重怎么办?
A4:

1)排查引物、模板,加对照实验,重复扩增验证

2)排查反应体系配置以及所用试剂是否正确保存

3)模板量如过大,存在抑制,可适当减少模板添加量

4)简单模板的预变性设置为95℃30sec-1min,对于复杂的模板,预变性时间延长至3min

Q5:该产品扩增后是否需要加入Loading Buffer?
A5:

不需要,本品已内置溴酚蓝示踪,PCR反应结束后可直接进行琼脂糖凝胶电泳。

Q6:该款预混液与其他PCR 预混液的区别?
A6:

该预混液是目前优选PCR预混液产品,高特异,高扩增力,可替换老款CW0690/CW0682等。

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