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SuperStar Universal SYBR Master Mix

SYBR染料法qPCR Mix

购买CW3360M，赠送CW3397S

¥198.00

CW3360M

5 mL
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本产品为2×预混型试剂，是染料法 (SYBR GreenⅠ) 实时荧光定量 PCR 的专用预混液，只需要添加引物和DNA模板即可进行qPCR实验。核心组分 Super Fast Star DNA Polymerase 是由抗体修饰的热启动酶，95℃加热5秒即可恢复DNA聚合酶活性，具有检测特异性强、灵敏度高、可兼容快速扩增程序和小体系扩增等诸多优点。
此外，本产品晃动不易产生气泡，内含ROX Reference Dye，可兼容多种qPCR仪，操作简单、便捷。


▪ 多平台通用：内含通用ROX，兼容多数qPCR仪，无需对不同仪器进行校正。
▪ 灵敏度高：在宽广的定量区域内具有良好的线性关系，可检测低至pg级的模板。
▪ 特异性强：独特的qPCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制非特异性扩增。
▪ 稳定性优：反复冻融20次性能稳定；37 ℃至少可储存7天。
▪ 隐藏属性：兼容快速扩增程序；可进行小体系检测。


1. 灵敏度高
【实验一】以人基因组DNA为模板，进行6个梯度10倍比稀释，对目的基因进行检测，实验数据如下：

图1：CW3360灵敏度检测实验结果图
实验结果表明：CW3360在宽广的定量区域内具有良好的线性关系，可检测低至pg级的基因组DNA模板。


2. 兼容小体系扩增

【实验二】以人基因组DNA为模板，进行3个梯度10倍比稀释，使用10 μL体系和20 μL体系进行平行测试，实验数据如下：


图2：CW3360小体系扩增检测实验结果图
实验结果表明：CW3360搭配10 μL和20 μL体系扩增结果无显著性差异，可应用于小体系检测。

3.兼容快速扩增程序
【实验三】以人基因组DNA为模板，进行3个梯度10倍比稀释，使用qPCR快速程序进行检测，实验数据如下：

图3：CW3360快速程序扩增检测实验结果图

实验结果表明：CW3360可兼容qPCR快速扩增程序。

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-20℃避光 冰袋
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Q1：cDNA模板需要稀释吗？应该稀释多少倍进行定量？
A1：

没有具体的稀释参考倍数，一般cDNA每稀释10倍CT值变大3.3，可以根据这个规律进行合适的稀释。可以使用cDNA原液、10倍稀释液、100倍稀释液作为模板进行定量实验，根据规律选择CT值落在18-28，或者15-33范围内的稀释倍数。也可以参考换试剂之前的稀释倍数。

Q2：扩增曲线形状异常怎么办？
A2：

1）扩增曲线不光滑：信号太弱，经系统矫正后产生。建议提高模板浓度重复实验。

2）扩增曲线断裂或下滑：一般由于模板浓度较高，基线的终点值大于CT值。建议减小基线终点（CT值-4），重新分析数据。

3）个别扩增曲线突然骤降：反应管内留有气泡，由于温度升高后气泡破裂，使仪器检测到的荧光值突然降低所致。建议反应前要仔细检查反应管内是否有气泡残留。

Q3：标准曲线扩增小于90%或者大于120%，线性关系不佳。
A3：

1）加样误差。加大模板稀释倍数，提高加样体积，使用不同稀释梯度的浓度更准确；

2）标准品降解，重新制备标准品，重复实验；

3）模板浓度过高，存在抑制反应，增加模板稀释倍数；

4）引物扩增特异性不好，重新设计引物重复实验。

Bian Z, Yang F, Xu P, et al. LINC01852 inhibits the tumorigenesis and chemoresistance in colorectal cancer by suppressing SRSF5-mediated alternative splicing of PKM. Mol Cancer. 2024, 10.1186/s12943-024-01939-7. PMID: 38263157. (IF:37.3)

Miao Y, Wang M, Sun H, Zhang Y, Zhou W, Yang W, Duan L, Niu L, Li Z, Chen J, Li Y, Fan A, Xie Q, Wei S, Bai H, Wang C, Chen Q, Wang X, Li Y, Liu J, Han Y, Fan D, Hong L. Bifidobacterium longum Metabolite Indole-3-Carboxaldehyde Blocks HDAC3 and Inhibits Macrophage NLRP3 Inflammasome Activation in Intestinal Ischemia/Reperfusion Injury. Inflammation. 2024 Dec 11. doi: 10.1007/s10753-024-02211-2. Epub ahead of print. PMID: 39663332. (IF:4.5)

Li H, Zeng T, Xiao X, Zhou Z, Liang A, Liu Y, Wang M, Luo Y, Xiao J, Xiao J. TRIM65 Promotes Osteogenic Differentiation by Regulating the PI3K/AKT Signaling Pathway. Open Med J. 2024; 11: e18742203331864. (IF:1.7)

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