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Direct DNA Amplification Kit

快速DNA直扩试剂盒

¥198.00

CW0557S

80 rxns
400 rxns

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本试剂盒包含快速组织裂解及扩增试剂,无需进行复杂的DNA抽提步骤。鼠尾、鼠趾、鼠耳、植物叶片、种子等各种动植物组织样本只需经过简单的裂解即可作为PCR扩增模板;血液、血片、唾液、菌液、细胞等样本甚至无需经过粗裂解步骤,可直接作为PCR扩增模板。

本产品扩增速度可达1 s/kb。2×Direct Amplification Mix (Dye)中含有电泳指示剂,PCR反应结束后可直接进行琼脂糖凝胶电泳,方便操作。

本试剂盒适用于小鼠转基因检测、小鼠基因分型、动植物直扩、血液直扩、菌落直扩等实验。


简便:无需复杂的样品处理步骤。

高抗逆:无需高纯度的核酸模板。

省样本:取2mm左右直径大小的组织即可。

安全:远离酚、氯仿等有毒物质,远离液氮研磨等危险操作。

低成本:无需额外购买基因组DNA提取试剂盒。


1. 直接PCR扩增

【实验一】取一定量的血液(1μL)、菌液(稀释10倍,取1μL)、唾液(1 μL)、细胞(2000个)样本不经过任何处理,直接加入到2×Direct Amplification Mix (Dye)中进行PCR扩增,反应体系25 μL。

图1-1:血液直扩    图1-2:唾液直扩     图1-3:菌液直扩      图 1-4:细胞直扩

实验结果表明:CW0557抗逆性好,样本兼容性广,可以进行血液、唾液、菌液、细胞样本的直接扩增。


2. 快速PCR扩增

【实验二】以小鼠尾巴为起始样本,使用CW0557中的DNA Extract Solution A/B液简单处理后,取上清为模板,使用2×Direct Amplification Mix(Dye)进行PCR扩增,使用不同的延伸时间,分别扩增2 kb和5 kb两个不同大小的目的基因,进行扩增速度检测。

图2:鼠尾直扩速度检测

实验结果表明:CW0557可以进行小鼠快速PCR直扩,扩增2 kb大小的片段,使用1 s/kb和2 s/kb延伸速度,扩增效果几乎无差别;扩增5 kb大小的片段,使用3 s/kb和5 s/kb延伸速度,扩增效果几乎无差别。


3. 与同类产品对比

【实验三】以人全血为模板,不经过任何处理,分别使用CW0557中的2×Direct Amplification Mix(Dye)与A公司同类产品同时扩增4个不同大小的目的基因。

图3:血液直扩与同类产品对比

实验结果表明:CW0557扩增能力更强。

保存条件 运输条件
-20±5℃ 冰袋
Q1:无产物或产物量少。
A1:

1)核对引物设计,确认引物的纯度和浓度;

2)重复实验,确认反应体系配制、反应程序设置无误;

3)增加循环数,或延长延伸时间;设置退火温度梯度,找到合适的退火温度。

Q2:使用植物叶片作为样本时如何处理样品?
A2:

推荐使用50μl反应体系并使用直径大小为0.5-3mm的幼嫩叶片。较小反应体系和过多的叶片使用量容易导致扩增失败。

Q3:有杂带或弥散条带。
A3:

优化引物设计,降低引物浓度;尝试提高退火温度或设置退火温度梯度,减少退火时间;减少总循环数;尝试不同的模板用量。

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