Magbead Plant RNA Kit
磁珠法植物RNA提取试剂盒
¥898.00
CW3710S
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本试剂盒提供了一种简单、高效的植物RNA自动化提取方案。植物组织经物理方法破碎后，裂解产物中的RNA在高盐存在时结合于硅基包被的磁珠表面，经漂洗液漂洗去除蛋白质等杂质，然后加入DNase I去除DNA，最后RNA经过漂洗后洗脱于RNase-Free Water中。本试剂盒提取得到的总RNA纯度高，无基因组DNA、蛋白质和其它杂质的污染，可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot和体外翻译等多种下游实验。
▪ 安全无毒：无需使用酚氯仿、β-巯基乙醇和DTT等有毒试剂。
▪ 高效提取：完整性好，得率高，无DNA 残留。
▪ 兼容性广：可兼容各种普通植物和多糖多酚植物的茎、叶、花、果实等组织。
▪ 操作简便：无需加热、蛋白酶K等操作。
▪ 高通量自动化：提取迅速，约35分钟即可完成96个样本的总RNA提取。
1.高得率
普通植物及水果果肉：
【实验一】分别取100 mg辣椒、番茄、桃叶、豇豆叶、玉米叶、花生叶，使用康为世纪和A公司的磁珠法植物RNA提取试剂盒进行总RNA提取，洗脱体积为100 μL，提取结果如下：
图1：普通植物及水果果肉总RNA提取浓度
图2：普通植物及水果果肉RNA提取纯度
图3：普通植物及水果果肉总RNA提取琼脂糖凝胶电泳图
实验结果表明：康为世纪磁珠法植物RNA提取试剂盒能够高效的从各种普通植物和果肉中提取高质量RNA。获得的总RNA完整性好，得率高，无DNA 残留。
多糖多酚植物：
【实验二】分别使用康为世纪和A公司的磁珠法植物RNA提取试剂盒对不同多糖多酚植物样本进行RNA提取，提取结果如下：
图4：多糖多酚植物总RNA提取琼脂糖凝胶电泳图
表1：多糖多酚植物总RNA提取浓度和纯度表
实验结果表明：康为世纪磁珠法植物RNA提取试剂盒能够高效的从各种多糖多酚植物中提取高质量RNA。获得的总RNA完整性好，得率高，无DNA 残留。
2. 样本兼容性广
【实验二】分别取100 mg各类型的植物样本，使用康为世纪磁珠法植物RNA提取试剂盒，进行总RNA提取，100 μL洗脱。提取结果如下。
图5：各种植物样本总RNA提取琼脂糖凝胶电泳图
实验结果表明：康为世纪磁珠法植物RNA提取试剂盒可以兼容各种类型的植物样本。获得的总RNA完整性好，得率高，无DNA 残留。
| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| DNase I, 10×Reaction Buffer -20℃，others RT (15-30℃) | DNase I及10×Reaction Buffer冰袋运输，其余组分室温运输 |
支持。CW3701S适配 CWE2100 和 CWE960 全自动核酸提取仪。
严禁冷冻或高速离心，否则可能导致磁珠不可逆损坏。使用前需充分混匀，避免沉淀。
不推荐用于高淀粉植物组织（如小麦干种子、玉米干种子），因其易形成胶状物，影响提取效果。
1) 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3) 配制溶液应使用无RNase的水。
4) 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
试剂盒包含 DNase I 处理步骤，可有效去除基因组DNA污染，无需额外处理。
1) 样本未充分破碎或裂解不完全；
2) 磁珠未充分混匀或结合时间不足；
3) Buffer PGW1 或 RW2 中未正确加入乙醇；
4) 乙醇残留未彻底挥发，影响洗脱效率。
1) 确保磁珠干燥适度（表面哑光无裂痕）；
2) 可适当延长65℃震荡洗脱时间；
3) 尝试用预热的RNase-Free Water进行洗脱。
取52 μL RNase-Free Water向其中加入8 μL 10×Reaction Buffer和20 μL DNase I（1U/ μL），混匀，配置成终体积为80 μL的反应液，配置好后放在冰上储存。
RNA纯度低通常由以下原因导致，请根据实际情况优化操作：
1) 组织研磨不充分或起始量过大会导致裂解不完全，使蛋白质、多糖等杂质大量残留。解决办法：确保组织充分破碎，并严格遵守试剂盒推荐的样本量范围，对于难裂解组织可适当减量。
2) 洗涤步骤不彻底会直接导致盐离子或乙醇残留。解决办法：确保向浓缩洗涤液（Buffer PGW1和Buffer RW2）中正确加入无水乙醇，并遵循指定的洗涤次数和体积。完成洗涤后需充分晾干（约5-10分钟），直至磁珠表面呈哑光，确保乙醇完全挥发。
3) 基因组DNA残留会使A260/A280比值偏高。解决办法：提取过程中增加DNase I消化步骤并确保DNase I活性完好，以彻底去除gDNA污染。
4) RNA降解会导致纯度下降和功能丧失。这通常由RNase污染或操作过程温度过高引起。解决办法：必须全程使用无RNase的枪头、离心管，佩戴手套并勤换，操作尽量快速并在低温下进行。提取完成后应立即将RNA分装并保存于-70℃冰箱，避免反复冻融。
