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HiFi V M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

逆转录酶

¥358.00

CW3374S

10000 U
200 kU
2000 kU

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HiFi V M-MLV (H-) Reverse Transcriptase是经过突变的M-MLV基因利用大肠杆菌工程菌进行重组与表达的逆转录酶，该酶能够催化以RNA或DNA:RNA杂交链为模板的互补DNA聚合反应。经过突变的HiFi V M-MLV (H-) Reverse Transcriptase RNase H活性缺失，减少了逆转录反应中RNA的降解，更容易获得全长的cDNA。HiFi V M-MLV(H-) Reverse Transcriptase在55℃表现出优良的逆转录活性（该酶最高可以用60℃做逆转录反应），针对复杂结构的RNA，提高逆转录反应温度可以明显提高cDNA的产率，此外，经过突变改造的HiFi V M-MLV (H-) Reverse Transcriptase，稳定性更加良好，可以合成最大15kb的cDNA。适用于第一链cDNA的合成、RT-PCR、RT-qPCR以及全长cDNA文库的构建等。

RNasin

货号：CW0596M / 250 μl

¥598.00

Magbead Tissue RNA Kit (DNase I)

货号：CW3711S / 96 preps

¥998.00

Magbead Plant RNA Kit

货号：CW3710S / 96 preps

¥898.00

Super DNA Marker

货号：CW2583S / 100 preps

¥98.00
保存条件 运输条件
-30 - -15℃ 干冰
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Q1：延长逆转录时间，是否可以提高逆转录效率？
A1：

对于大多数基因，延长逆转录时间对逆转录效率并没有显著提升；对于一些GC含量较高或含高级结构的模板，延长逆转录时间可提升逆转录效率。

Q2：如何评判RNA质量？
A2：

RNA质量从两个方面反应：

(1) RNA完整度。通过琼脂糖凝胶电泳验证RNA完整度。以真核生物为例，完整的总RNA有清晰的三条带，分子量从大到小分别为28S、18S、5S，并且28S是18S亮度的两倍；若能看见三条带，但带型模糊或弥散，则说明RNA有部分降解，此时请立即进行逆转录反应，并适量加大模板量；若只能看见分子量很小的一条带或没有条带，则 RNA 已完全降解，需要重新提取。

(2) RNA的纯度。RNA的纯度可以通过OD260/280和OD260/230两个比值是否在1.8-2.1范围内进行判断，蛋白、离子等残留会使比值降低。

Q3：可以通过测逆转产物cDNA浓度判定逆转效率吗？
A3：

不可以，逆转录产物cDNA是混合物，除了cDNA产物以外，还有buffer、逆转录酶、引物，同时还包含未转录的模板RNA，总RNA中的tRNA、rRNA等，都会干扰浓度测定结果，因此不能反应真实的cDNA产量。

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