Gel Rapid Extraction Kit

琼脂糖凝胶DNA快速回收试剂盒

¥508.00

CW2303M

200 preps

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本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过独特的离心吸附柱快速结合的技术,可从普通或低熔点琼脂糖凝胶中回收纯化100 bp-10 kb的DNA片段,同时能用于直接纯化PCR产物,满足多种实验需求。整个操作过程快速方便,无需进行柱平衡,十几分钟即可完成片段回收。每个吸附柱可吸附高达10 μg的DNA,纯化回收的DNA纯度及回收量高,完整性好,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。


操作简单:无需柱平衡,操作简单方便,15 min内即可完成。

兼容性强:一盒两用,既可作DNA 凝胶回收,又能用于直接纯化PCR产物,满足多种实验需求。

回收效率高:独特的溶胶液和离心柱,提高回收效率。

实验可视化:溶胶液中含pH指示剂,保证操作准确性。


1. 回收效率高

【实验一】分别对100 bp、200 bp、500 bp、800 bp、1 kb、2 kb、4 kb、8 kb、10 kb的PCR产物进行纯化,将纯化前后的片段同时进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果如下图所示:

图1:不同片段大小PCR产物纯化结果

实验结果表明:康为世纪回收试剂盒在100 bp-10 kb片段范围均具有较好的回收效果。


【实验二】使用康为世纪和品牌A的回收试剂盒同时对100 bp、500 bp、1 kb、4 kb片段进行切胶回收,将回收产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如下:


图2:康为世纪和品牌A试剂盒回收不同长度DNA 片段结果

实验结果表明:康为世纪回收试剂盒回收效率表现优异。

保存条件 运输条件
RT(15-30℃) 室温
Q1:加入Buffer GP后溶液为什么变成黄色?
A1:

Buffer GP中含有PH指示剂,当PH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时的DNA才能有效的与膜结合。当PH值偏高时溶液的颜色变为即桔红色和紫色,此时可向胶溶液中加入10-30 μL3 M醋酸钠(PH 5.0),将溶液的颜色调为黄色后再进行后续实验。

Q2:Buffer GP出现结晶或沉淀该如何解决?
A2:

Buffer GP出现结晶或沉淀现象,可在37℃水浴至重新恢复澄清。

Q3:回收小片段DNA(<300 bp)有什么注意事项?
A3:

可在溶胶后或PCR产物中加入1/2体积的异丙醇,以提高回收率。

Q4:DNA回收率低的原因和解决办法?
A4:

(1) 琼脂糖凝胶未完全溶化:尽可能去除不含目的片段的琼脂糖,溶胶过程间隔性的摇晃促进凝胶充分溶化,仔细检查确保无固体琼脂糖残留;

(2) 回收片段过小:若回收小于300 bp DNA片段时,可在溶胶后加入1/2倍凝胶体积的异丙醇,混匀后再按后续步骤进行操作;

(3) 试剂准备有误:Buffer PW第一次使用前需按试剂瓶标签的说明加入相应的无水乙醇;

(4) 洗脱效率低:洗脱体积请勿低于30 μL;可将第一次离心的洗脱液重新加至吸附柱中,室温静置2分钟后再次离心;此外若回收的DNA片段大于10 kb,可预先将Buffer EB50℃水浴中预热;

Q5:样品体积大于750 μL怎么办?
A5:

可以分批次加入吸附柱中,每次不超过750 μL,依次离心。

Q6:回收的DNA可以用于哪些下游实验?
A6:

回收的DNA纯度高,可用于测序、连接、转化、标记、体外转录等分子生物学实验。

Q7:是否可用于回收PCR产物?
A7:

可以,操作流程见说明书第二部分“PCR反应液回收操作步骤”。

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