HiFiScript SuperFast gDNA Removal cDNA Synthesis Kit
通用型快速逆转录试剂盒（去基因组）
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¥398.00
CW3406M
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本产品可完成去除基因组DNA与逆转录反应，该试剂盒在42℃ 2 min即可除去基因组DNA。本产品配有新型高效反转录酶，新颖突变位点大幅提升酶的转录活性。本产品进一步提高了逆转录效率，仅需5 min便可合成长片段cDNA。4×HiFiScript RT Superfast Mix预混了逆转录酶、dNTP Mix、RNase inhibitor等，反应时只需要根据下游实验添加适当的逆转录引物便可高效合成cDNA，操作方便快捷。本试剂盒适用于第一链cDNA 的合成、长片段cDNA扩增和下游qPCR定量反应，可进行高效的基因表达分析。
| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| -20±5℃ | 干冰 |
可以。原核生物RNA没有polyA尾，所以在逆转录反应体系中需要以Random primer作为逆转录引物。
对于大多数基因，延长逆转录时间对逆转录效率并没有显著提升；对于一些GC含量较高或含高级结构的模板，延长逆转录时间可提升逆转录效率。
根据实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT或基因特异性引物进行逆转录。
(1) 随机引物：随机结合在RNA的任何区域，适用于rRNA、mRNA、tRNA等所有RNA类型的逆转录反应。
(2) Oligo dT：适用于具有PolyA尾的RNA（原核生物RNA、真核生物的rRNA和tRNA不具有PolyA尾）。 由于Oligo dT结合在PolyA尾上，所以对 RNA 样品的质量要求较高，即使有少量的降解也会使全长cDNA合成量大大减少。
(3) 基因特异性引物：与模板序列互补，适用于序列已知的基因逆转录。cDNA后续进行PCR扩增长片段，一般用Oligo dT或者基因特异性引物，不建议使用随机引物，因为随机引物是随机结合的，cDNA片段会偏短，可能会对长片段扩增造成稀释，后续扩增不出全长的目的基因；cDNA后续进行qPCR，一般使用Oligo dT和随机引物的混合物，可以避免3’端和5’端的扩增偏好性。
不可以，逆转录产物cDNA是混合物，除了cDNA产物以外，还有buffer、逆转录酶、引物，同时还包含未转录的模板RNA，总RNA中的tRNA、rRNA等，都会干扰浓度测定结果，因此不能反应真实的cDNA产量。
