Cell Counting Kit(CCK-8)

CCK-8试剂盒

¥118.00

CW9101M

500 T

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CCK-8是一款基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H四唑单钠盐)的快速、高灵敏度比色检测试剂盒,在电子耦合剂1-Methoxy PMS的存在下,WST-8可被线粒体内的一些脱氢酶还原,生成橙黄色的水溶性甲臜(formazan),颜色深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。通过使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,可以反映活细胞数量。该试剂盒适用于细胞增殖测定、细胞毒性检测、药物筛选以及细胞生长抑制检测等领域。

保存条件 运输条件
-20℃ 冰袋
Q1:CCK-8试剂是否会对细胞进行染色?
A1:

不会。试剂成分WST-8及其反应产物甲臜均为水溶性分子,不会进入细胞内。反应结束后更换培养基即可完全清除。

Q2:培养基中的酚红是否会影响检测结果?
A2:

不会。通过设置空白对照(培养基+CCK-8)扣除本底吸光度,可有效消除酚红的影响。

Q3:推荐的细胞接种密度是多少?
A3:

贴壁细胞建议至少1000/孔(100μl培养基),悬浮细胞至少2500/孔。建议通过预实验确定最佳接种密度。

Q4:如何确定CCK-8试剂的加入量?
A4:

常规加入量为培养基体积的10%

Q5:是否需要更换培养基后再加入CCK-8?
A5:

一般情况下无需更换。但当培养基中存在氧化还原性物质或细胞死亡释放乳酸脱氢酶时,建议在加入CCK-8前更换新鲜培养基,以消除药物干扰。若影响较小,可通过设置药物空白对照进行本底扣除。

Q6:吸光度值偏高什么原因?
A6:

空白值高:检查培养基是否污染,可通过过滤除菌或更换新培养基解决

实验值高:可能因细胞数量过多、反应时间过长或存在还原性物质,应减少细胞数、缩短反应时间至1小时或更换培养基

Q7:吸光度值偏低如何优化?
A7:

可通过增加细胞数量或延长CCK-8孵育时间(1-4小时)来改善。

Q8:细胞死亡后OD值仍正常可能的原因?
A8:

死亡细胞释放的乳酸脱氢酶仍能还原WST-8,或待测药物本身具有还原性。建议加入CCK-8前更换新鲜培养基。

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